Wulandari, Belinda Claudia (2019) Isolasi dan Identifikasi Mikroorganisme Penghasil Enzim Selulase dari Ampas Tebu untuk Produksi Bioetanol Generasi Kedua. Sarjana thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Ampas tebu merupakan sisa dari proses ekstraksi cairan tebu yang masih belum banyak dimanfaatkan sebagai produk yang memiliki nilai tambah. Kandungan selulosa yang tinggi dari ampas tebu (50%), membuatnya menjadi habitat bagi mikroorganisme selulolitik. Mikroorganisme selulolitik merupakan mikroorganisme yang memiliki kemampuan untuk menguraikan selulosa menjadi monomer glukosa oleh enzim selulase. Kemampuan enzim selulase ini membuatnya memiliki potensi dalam Industri, seperti konversi biomassa lignoselulosa. Tujuan dari penelitian ini adalah mendapatkan isolat penghasil enzim selulase dengan aktivitas tinggi dari ampas tebu, mengetahui aktivitas enzim selulase kasar yang dihasilkan oleh isolat hasil isolasi dari ampas tebu, dan mengetahui tingkat kekerabatan isolat hasil isolasi dari ampas tebu dengan mikroorganisme lain. Tahapan penelitian yang dilakukan meliputi, isolasi dan skrining mikroorganisme penghasil enzim selulase, uji aktivitas enzim selulase dan identifikasi mikroorganisme secara molekuler. Uji aktivitas enzim selulase dilakukan secara kuantitatif menggunakan uji DNS dan kit Megazyme CellG5. Identifikasi isolat penghasil enzim selulase secara molekuler dilakukan dengan metode 16S-rRNA. Berdasarkan hasil penelitian, didapatkan 96 isolat dari hasil spread plate yang berhasil diisolasi pada media Carboxymethyl Cellulose (CMC) dan 28 isolat diantaranya memiliki potensi sebagai penghasil enzim selulase, ditandai dengan adanya zona bening disekitar koloni setelah dilakukan pewarnaan congo red. Isolat AT17 merupakan isolat dengan aktivitas selulase tertinggi dengan aktivitas selulase pada uji DNS dan kit Megazyme CellG5 secara berturut-turut 0,527 Unit/mL dan 0,212 Unit/mL pada inkubasi 48 jam dengan aktivitas spesifik enzim sebesar 0,061 Unit/mg. Identifikasi 16S-rRNA dan konstruksi pohon filogenetik dengan MEGA6 menunjukkan bahwa isolat AT17 diidentifikasi sebagai Burkholderia cepacia.
English Abstract
Sugarcane bagasse is produced from sugarcane extraction that still has not been fully used as added value products. It is containing high amount of cellulose (50%), making it a habitat for cellulolytic microorganism. Cellulose can be degraded become glucose monomer by cellulase enzyme in cellulolytic microorganism, which is potential for lignocellulose biomass conversion in Industry. The purpose of these research are obtaining isolate producing cellulase with high activity from sugarcane bagasse, discovering crude cellulase activity produced by isolate isolated from sugarcane bagasse, and discovering genetic relationship between isolate isolated from sugarcane bagasse with other microorganism. This study was conducted by isolation and screening of cellulolytic microorganism, enzyme activity assay, and molecular identification of microorganism. Cellulase enzyme activity assay were carried out quantitatively using Dinitrosalicylic acid (DNS) test and Megazyme CellG5 kit. Molecular identification was carried out using 16S-rRNA. Based on the result, total 96 isolates from spread plate were successfully isolated in Carboxymethyl Cellulose (CMC) media and 28 of them showed halozone around the colony after congo red staining, indicate their ability to hydrolyzed cellulose substrate. Cellulase enzyme with high activity obtained from AT 17; 0,527 Unit/mL on DNS test and 0,212 Unit/mL on Megazyme CellG5 kit test and enzyme specific activity 0,061 Unit/mg. Isolate AT 17 identified as Burkholderia cepacia based on 16SrRNA identification and phylogenetic tree design.
| Item Type: | Thesis (Sarjana) |
|---|---|
| Identification Number: | SKR/FTP/2019/560/052002621 |
| Uncontrolled Keywords: | Ampas tebu, Enzim selulase, Identifikasi, Isolasi -Cellulase ,Identification, Identification, Sugarcane bagasse |
| Subjects: | 500 Natural sciences and mathematics > 572 Biochemistry > 572.7 Enzymes > 572.756 Enzymes catalyzing reactions of specific chemicals (Cellulases) |
| Divisions: | Fakultas Teknologi Pertanian > Teknologi Hasil Pertanian |
| Depositing User: | Agus Wicaksono |
| Date Deposited: | 18 Aug 2020 03:16 |
| Last Modified: | 18 Aug 2020 03:16 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/180340 |
Actions (login required)
 |
View Item |