Yuningsih, - (2017) Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella Asiatica) Terhadap Ekspresi Glucose Transporter 1 (Glut 1) Dan Osteocalsin Pada Stunting Larva Ikan Zebra (Danio Rerio) Akibat Induksi Rotenon. Magister thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Stunting adalah suatu keadaan dimana indeks panjang badan menurut umur (PB/U) atau tinggi badan dibagi umur rata-rata kurva pertumbuhannya <-2 SD dari ratarata pertumbuhan normal. Prevalensi Stunting di Indonesia mengalami kenaikan dari 35,6 % (2010) menjadi 37,2 % (2013) dan merupakan negara tertinggi di Asia Tenggara, oleh sebab itu diperlukan perhatian khusus karena memberi dampak terhadap SDM generasi penerus bangsa sehingga dapat terjadi penurunan perekonomian negara. Faktor penyebab terjadinya Stunting adalah kekurangan nutrisi dan paparan pestisida. Rotenon adalah salah satu jenis pestisida yang dapat mengakibatkan terjadinya stress oksidatif karena peningkatan ROS. Rotenon menghambat kompleks I mitokondria berakibat ATP berkurang, terlepasnya Cytocrom-c, aktivasi caspase 3, fragmentasi DNA sehingga terjadi apoptosis. Adanya ROS yang meningkat mempengaruhi GLUT 1 sebagai transporter glukosa dari luar kedalam sel untuk semua sel termasuk sel untuk pertumbuhan tulang osteocalsin. Untuk mengatasi adanya ROS maka diperlukan antioksidan. Bahan aktif dalam pegagan diantaranya adalah terdapat antioksidan, vitamin, anti apoptosis, mikronutrien dan makronutrien yang dibutuhkan tubuh untuk proses tumbuh kembang. Penelitian ini berdasarkan penelitian terdahulu yang telah dilakukan Ridlayanti, (2016) dan Wijayanti, (2016) yang menjelaskan bahwa rotenon konsentrasi 10 ppb dapat menyebabkan terjadinya Stunting pada larva ikan zebra, tetapi belum mendapatkan hasil yang maksimal. Pada penelitian tersebut juga dibuktikan adanya penambahan ekstrak pegagan dapat mencegah terjadinya Stunting melalui peningkatan ekspresi BDNF dan dapat mencegah terjadinya apoptosis dengan menurunnya ekspresi BAX dan Hsp60. Pada penelitian ini membuktikan rotenon 12,5 ppb dapat menyebabkan terjadinya Stunting dan penambahan ekstrak pegagan dapat meningkatkan panjang badan pada larva ikan zebra yang diinduksi rotenon melalui ekspresi GLUT 1 dan osteocalsin. Metode pada penelitian ini adalah eksperimental dengan menggunakan hewan coba ikan zebra sebanyak 20 embrio tiap kelompok yang diinduksi rotenon 12,5 ppb yang diberikan mulai 2 hpf sampai 72 hpf. Kelompok Perlakuan terdiri dari 5 kelompok yaitu kelompok kontrol, kelompok rotenon, kelompok rotenon, kelompok rotenon+ekstrak pegagan konsentrasi 1,25 μg/ml, kelompok rotenon+ekstrak pegagan konsentrasi 2,5 μg/ml dan kelompok rotenon+ekstrak pegagan konsentrasi 5 μg/ml. Embrio diikuti perkembangannya dengan mengukur panjang badan dan rasio panjang kepala terhadap badan pada usia 3, 6, 9 dpf dengan menggunakan Software Image Raster 3. Pengukuran ekspresi GLUT 1 dan osteocalsin pada usia 9 dpf dengan menggunakan wholemount imunohistokimia dengan pewarnaan DAB yang kemudian muncul warna coklat yang diukur dengan Software Image J melalui penghitungan integrated density dalam satuan pixel. Hasil penelitian yang telah dilakukan didapatkan hasil larva ikan zebra yang diinduksi rotenon saat usia 3 dpf yang analog dengan bayi baru lahir antara kelompok kontrol dan kelompok rotenon tidak ada perbedaan signifikan pada panjang badannya. Sedangkan pada 6 dpf yang analog dengan anak usia 2 tahun terdapat perbedaan panjang badan yang signifikan (p-value=0.05) antara kelompok kontrol dan kelompok rotenon dengan perbedaan panjang badan >2 SD dari kelompok kontrol. Begitupun juga pada usia 9 dpf yang analog dengan 8 tahun antara kelompok kontrol dan kelompok rotenon terdapat perbedaan panjang badan signifikan selisih > 2 SD. Dari data hasil penelitian tersebut dapat ditarik kesimpulan rotenon konsentrasi 12,5 ppb dapat menyebabkan terjadinya Stunting. Pada usia 3 dpf tidak terdapat perbedaan signifikan pada semua kelompok tidak hanya pada kelompok kontrol dan rotenon tetapi juga pada kelompok rotenon+ekstrak pegagan 3 konsentrasi berbeda (1,25 μg/ml ; 2,5 μg/ml ; 5 μg/ml) yang diberikan secara bersamaan. Rotenon+pegagan konsentrasi 1,25 μg/ml belum dapat memberikan perbedaan panjang badan signifikan dengan kelompok rotenon sedangkan konsentrasi 2,5 μg/ml dan 5 μg/ml terdapat perbedaan signifikan saat usia 6 dpf dan 9 dpf. Dari data tersebut dapat ditarik kesimpulan bahwa pegagan konsentrasi 2,5 μg/ml dan 5 μg/ml dapat meningkatkan panjang badan larva ikan zebra yang diinduksi rotenon. Adanya pertambahan panjang badan seiring dengan peningkatan ekspresi pada GLUT 1 dan Osteocalsin pada pegagan konsentrasi 2,5 μg/ml dan 5 μg/ml. Ekspresi GLUT 1 dan osteocalsin pada kelompok kontrol dan rotenon terjadi perbedaan signifikan dimana kelompok rotenon mengalami penurunan ekspresi secara signfikan dari kelompok kontrol. Peningkatan konsentrasi pegagan dengan ekspresi GLUT 1 menunjukkan korelasi yang positif dan sangat kuat (0.873) begitu pula dengan ekspresi osteocalsin menghasilkan korelasi positif dan kuat (0.671). Peningkatan ekspresi GLUT 1 dan osteocalsin yang dihubungkan dengan peningkatan panjang badan mempunyai korelasi positif dan kuat. Sedangkan korelasi antara ekspresi GLUT 1 dan osteocalsin mempunyai korelasi positif dan kuat (0.735). Kesimpulan pada penelitian ini adalah rotenon konsentrasi 12,5 ppb dapat menyebabkan terjadinya Stunting pada larva ikan zebra. Penambahan ekstrak etanol pegagan dapat meningkatkan panjang badan dan mencegah Stunting melalui peningkatan ekspresi GLUT 1 dan osteocalsin.
English Abstract
Stunting is situation where body length index based on the age (PB/U) or body High divided age average the curves growth <-2 SD from average normal growth. Prevalence Stunting Indonesia experienced increasing from 35,6% (2010) become 37,2% (2013) and The highest in southeast Asia, Therefore a needed special attention because given impact for Human Resorce the next generation, so it make lowering occur economic state. The caused factor is lowering nutrient and pesticide reaction. Rotenon is one of pesticide with caused stress oxide caused increasing ROS. Rotenon obstruct complex I mitokondria, so it can cause lowering ATP. Out of Cytocrom- c, caspase 3 activation, fragmentation it cause apoptosis occur. Existence ROS and increasing GLUT 1, it can influence become glucose transporter from outside cell in cell for alls cell to growth osteocalsin bone. For superintend ROS, it needed antioxidant. Substance active in pegagan such as antioxidant , vitamin, anti apoptosis, micronutrient and macronutrient, those all is needed for our body growth. This research based on the previous research by Ridlayanti,(2016)and Wijayanti, (2016) that is explain if concentration rotenon 10 ppb can caused Stunting occur to zebrafish larva, but it is maximal result yet. In this research also prove if added pegagan extract can prevent Stunting occur by increasing BDNF expression and it can prevent apoptosis occur by lowering BAX expression and Hsp60. In this research proved rotenone 12,5 ppb can cause Stunting occur and added pegagan extract can increase body length in zebrafish larva by induction rotenone through GLUT 1 expression and osteocalsin. The method of this research is experimental by trial animals embryo zebrafish, amount of this embryo 20, each group which induction rotenone 12,5 ppb since 2 hpf until 72 hpf. Treatment of this group divide into fifth group such as control group, rotenone group, rotenon group, rotenone + extract pegagan group concentration 1,25 μg/ml, rotenone + extract pegagan group concentration 2,5 μg/ml and rotenone + extract pegagan group concentration 5 μg/ml. Embryo growing measuring by body length and ratio head length for body at 3,6,9 age pdf and software Image Raster 3 is used. Measuring expression GLUT 1 and osteocalsin at 9 pdf by use whole mount imunohistokimia which coloring DAB and then raise brown color, it is measure by software Image J with an enumeration integrated density in pixel unit. The result of this research is got zebrafish which induction at 3 pdf in this case, baby analog between control group and rotenone group not found significant difference in body length. Meanwhile at 6 pdf which analog at 2 age pdf founded significant difference body length (p-value=0.05) between control group and rotenone group which difference body length >2 SD from control group. Likewise at 9 age pdf which analog 8 year old between control group and rotenone group founded significant difference body length >2 SD. Based on the data research result , it can be concluded that concentration rotenon 12,5 ppb, it can caused Stunting. At 3 age pdf not found significant difference for all groups, not only in control group and rotenone, but also in rotenone + pegagan extract group 3 difference concentration (1,25 μg/ml;2,5 μg/ml;5 μg/ml) together given. Rotenon + pegagan concentration 1,25 μg/ml, that is not given difference body length significant with retonen group. Meanwhile concentration 2,5 μg/ml;5 μg/ml founded significant difference at 6 dpf and 9 dpf. From those data, it can be concluded if concentration pegagan 2,5 μg/ml;5 μg/ml it can increasing body length zebrafish larva which induction rotenone. Existence body length along with increasing expression in GLUT 1 and Osteocalsin in concentration pegagan 2,5 μg/ml;5 μg/ml. Expression GLUT 1 and Osteocalsin in control group and rotenone, it found significant difference, where rotenone group lowering expression on significant from control group. Increasing concentration pegagan with GLUT 1 expression, it is showed positive correlation and strong (0.873). Similarly with osteocalsin expression showed positive correlation and strong (0.671). Increasing GLUT 1 expression and osteocalsin which connected with increasing body length, it have positive correlation and strength. Meanwhile correlation between GLUT 1 expression and osteocalsin have positive correlation and strength (0.735) From the research, it can be concluded that concentration rotenone 12,5 ppb, it can caused Stunting in zebrafish larva. Added pegagan ethanol extract can increase body length and prevent Stunting by increasing GLUT 1 expression an osteocalsin.
| Item Type: | Thesis (Magister) |
|---|---|
| Identification Number: | TES/615.323 849/YUN/p/2017/041708536 |
| Uncontrolled Keywords: | UMBELLIFERAL, ZEBRADANIO, ROTENONE, GLUCOSE |
| Subjects: | 600 Technology (Applied sciences) > 615 Pharmacology and therapeutics > 615.3 Organics drugs > 615.32 Drugs derived from plants and mikroorganisms > 615.323 87 Drugs derived from olive oil |
| Divisions: | S2/S3 > Magister Kebidanan, Fakultas Kedokteran |
| Depositing User: | Nur Cholis |
| Date Deposited: | 13 Sep 2017 04:32 |
| Last Modified: | 14 Dec 2020 12:15 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/2472 |
Preview |
Text
YUNINGSIH.pdf Download (2MB) | Preview |
Actions (login required)
 |
View Item |