Ramadani, Devi and Prof. Dr. Aulanni’am, drh., DES and Dr.Arie Srihardyastutie, S.Si., M.Kes (2025) Karakterisasi Enzim Thyroid Peroxidase (TPO) 52 kDa Serum Manusia dan Antibodi Hasil Induksi Secara In Vitro Dan In Vivo. Magister thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Hipotiroidisme ditandai dengan produksi hormon tiroid yang tidak memadai, terutama tiroksin (T4) dan triiodotironin (T3). Thyroid Peroxidase (TPO) adalah enzim yang sangat penting untuk produksi hormon tiroid dan juga berfungsi sebagai autoantigen utama dalam kondisi tiroid autoimun, seperti tiroiditis Hashimoto dan penyakit Graves. Keberadaan antibodi anti-peroksidase tiroid (anti-TPO) menunjukkan adanya respons autoimun, di mana sistem kekebalan tubuh yang biasanya mengenali TPO sebagai bagian dari tubuh (self), mulai menganggapnya sebagai benda asing (non-self). Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi TPO dari sampel pasien hipotiroid dan pasien sehat, membuktikan sifat imunogenik TPO melalui titer antibodi dan sensitivitasnya, dan menganalisis perbedaan aktivitas TPO pada pasien hipotiroid dan pasien sehat. Isolasi protein enzim TPO dilakukan melalui teknik SDS-PAGE dan dikonfirmasi dengan teknik western blot yang menunjukkan berat molekul 52 kDa. Pada sampel pasien normal, aktivitas enzim TPO ratarata adalah 34,33 U/mL, sedangkan pada pasien hipotiroid, aktivitas rata-rata meningkat menjadi 49,46 U/mL yang disebabkan oleh reaksi imun yang lebih tinggi terhadap enzim TPO sehingga meningkatkan aktivitas TPO. Produksi antibodi poliklonal TPO pada kelinci menunjukkan produksi antibodi tertinggi pada minggu ke-8 setelah booster ke 2, dengan nilai absorbansi pada 405 nm sebesar 0,555. Analisis dot blot juga mengonfirmasi sensitivitas anti-TPO pada berbagai pengenceran, dengan sensitivitas tinggi pada pengenceran 1:80 yang masih dapat mendeteksi TPO dalam serum pasien.
English Abstract
Hypothyroidism is characterized by inadequate thyroid hormone production, especially thyroxine (T4) and triiodothyronine (T3). Thyroid Peroxidase (TPO) is a crucial enzyme for thyroid hormone production and also serves as a major autoantigen in autoimmune thyroid conditions, such as Hashimoto's thyroiditis and Graves' disease. The presence of anti-thyroid peroxidase (anti-TPO) antibodies indicates an autoimmune response, where the immune system, which typically recognizes TPO as part of the body (self), begins to regard it as foreign (non-self). This study aims to identify TPO from hypothyroid and healthy patient samples, prove the immunogenic properties of TPO through antibody titer and sensitivity, and analyze the difference in TPO activity between hypothyroid and healthy patients. The isolation of the TPO enzyme protein was carried out using SDS-PAGE and confirmed with western blot, which showed a molecular weight of 52 kDa. In the normal patient samples, the average TPO enzyme activity was 34.33 U/mL, while in hypothyroid patients, the average activity increased to 49.46 U/mL due to a higher immune reaction against TPO enzyme, thus enhancing TPO activity. Polyclonal TPO antibody production in rabbits showed the highest antibody production in the 8th week after the second booster, with an absorbance value at 405 nm of 0.555. Dot blot analysis also confirmed the sensitivity of anti-TPO at various dilutions, with high sensitivity at a 1:80 dilution that could still detect TPO in patient serum.
| Item Type: | Thesis (Magister) |
|---|---|
| Identification Number: | 0425090001 |
| Divisions: | S2/S3 > Magister Kimia, Fakultas MIPA |
| Depositing User: | Unnamed user with username nova |
| Date Deposited: | 21 Jan 2025 02:20 |
| Last Modified: | 21 Jan 2025 02:20 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/235156 |
![[thumbnail of DALAM MASA EMBARGO]](http://repository.ub.ac.id/style/images/fileicons/text.png) |
Text (DALAM MASA EMBARGO)
Devi Ramadani.pdf Restricted to Registered users only Download (4MB) |
Actions (login required)
 |
View Item |