Efek Terapi Kombinasi Doxorubicin Dan Ekstrak Etanol 96% Daun Zodia (Evodia Suaveolens) Terhadap Ekspresi Cyclin B1 Dan Proliferasi Pada Sel Acute Myeloid Leukemia In Vitro

Afida, Icha Nadhirotul Izza and Prof. Agustina Tri Endharti, S.Si, Ph.D, and dr. Elviana Norahmawati, Sp.PA(K). (2024) Efek Terapi Kombinasi Doxorubicin Dan Ekstrak Etanol 96% Daun Zodia (Evodia Suaveolens) Terhadap Ekspresi Cyclin B1 Dan Proliferasi Pada Sel Acute Myeloid Leukemia In Vitro. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Acute Myeloid Leukemia (AML) merupakan salah satu gangguan hematopoietik yang ditandai dengan proliferasi tidak terkontrol dari sel mieloid progenitor pada sumsum tulang. Salah satu yang berperan dalam patogenesis ini adalah Cyclin B1. Ikatan antara Cyclin B1 dan CDK1 yang tidak terkontrol akan menyebabkan terjadinya proliferasi yang abnormal pada AML. Obat kemoterapi standar yang digunakan pada kasus AML adalah kombinasi doxorubicin dan cytarabine, namun penggunaan obat tersebut memiliki efek samping jika digunakan secara terus-menerus dan dengan dosis yang tinggi. Tanaman zodia (Evodia suaveolens) merupakan suatu kandidat obat herbal yang mengandung senyawa aktif dan memiliki aktivitas anti-kanker yang dapat menghambat proliferasi pada sel kanker. Namun, efek ekstrak daun zodia terhadap ekspresi Cyclin B1 dan proliferasi sel pada AML masih belum diketahui. Penelitian ini digunakan kultur sel HL-60 yang diterapi dengan kombinasi doxorubicin dan ekstrak daun zodia. Sel HL-60 tersebut dibagi enam kelompok perlakuan: kontrol negatif tidak diberi perlakuan, kontrol positif diberi doxorubicin 0.2 µg/mL, kelompok 1-3 diberi kombinasi doxorubicin 0.2 µg/mL dan ekstrak daun zodia masing-masing 0.2, 0.4, 0.8 mg/mL (D1, D2, dan D3) dan kelompok 4 diberi ekstrak daun zodia 0.8 mg/mL (D4). Setelah diinkubasi 48 jam, sel-sel tersebut dilakukan pemeriksaan ekspresi Cyclin B1 menggunakan imunofluoresensi dan proliferasi sel dihitung menggunakan pengujian MTT (Microculture Tetrazolium Technique). Analisis data dilakukan dengan uji normalitas dan homogenitas terlebih dahulu. Lalu dilanjutkan dengan uji menggunakan uji One-Way Anova dan Two-Way Anova serta dilakukan uji lanjut menggunakan uji Tukey. Data yang didapatkan menunjukkan bahwa data berdistribusi normal dan homogen serta setiap perlakuan berpengaruh secara signifikan terhadap kadar ekspresi cyclin B1 dan proliferasi sel. Berdasarkan uji Tukey pada ekspresi cyclin B1 menunjukkan bahwa perlakuan kontrol negatif berbeda secara signifikan terhadap kontrol positif, perlakuan kombinasi (D1-D3) dan perlakuan ekstrak saja (D4). Sedangkan kontrol positif berbeda signifikan terhadap perlakuan D3 dan D4 namun tidak berbeda secara signifikan dengan D1 dan D2. Lalu D1 berbeda signifikan dengan D3 dan D4 tetapi tidak berbeda secara signifikan dengan D2. D2 berbda secara signifikan dengan D3 dan tidak berbeda secara signifikan dengan D4. D3 dan D4 tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan. Sedangkan hasil pada uji tukey pada proliferasi sel menunjukkan bahwa setiap perlakuan berbeda secara signifikan. Hasil terbaik menunjukkan dengan pemberian terapi kombinasi doxorubicin 0.2 µg/mL dan ekstrak zodia 0.8 mg/ml yang ditandai dengan penurunan ekspresi cyclin b1 dan proliferasi sel paling rendah. Sehingga dapat disimpulkan bahwa terapi kombinasi antara doxorubicin dan ekstrak zodia dapat digunakan sebagai terapi antikanker dengan cara menghambat ekspresi cyclin b1 dan proliferasi sel.

English Abstract

Acute Myeloid Leukemia (AML) is a hematopoietic disorder characterized by uncontrolled proliferation of myeloid progenitor cells in the bone marrow. One that plays a role in this pathogenesis is Cyclin B1. Uncontrolled binding between Cyclin B1 and CDK1 will lead to abnormal proliferation in AML. The standard chemotherapy drug used in AML cases is a combination of doxorubicin and cytarabine, but the use of these drugs has side effects if used continuously and at high doses. The zodia plant (Evodia suaveolens) is a candidate herbal medicine that contains active compounds and has anti-cancer activity that can inhibit proliferation in cancer cells. However, the effect of zodia leaf extract on Cyclin B1 expression and cell proliferation in AML is still unknown. This study used HL-60 cell culture treated with a combination of doxorubicin and zodia leaves extract. The HL-60 cells were divided into six treatment groups: negative control untreated, positive control treated with doxorubicin 0.2 µg/mL, groups 1-3 treated with a combination of doxorubicin 0.2 µg/mL and zodia leaf extract 0.2, 0.4, 0.8 mg/mL respectively (D1, D2, and D3) and group 4 treated with zodia leaf extract 0.8 mg/mL (D4). After 48 hours incubation, the cells were examined for Cyclin B1 expression using immunofluorescence and cell proliferation was calculated using MTT (Microculture Tetrazolium Technique) assay. Data analysis was performed with normality and homogeneity tests first. Then continued with tests using One-Way Anova and Two-Way Anova tests and further tests using the Tukey test. The data obtained showed that the data were normally distributed and homogeneous and each treatment significantly affected the levels of cyclin B1 expression and cell proliferation. Based on Tukey's test on cyclin B1 expression showed that the negative control treatment was significantly different from the positive control, combination treatment (D1-D3) and extract treatment alone (D4). While the positive control is significantly different from the D3 and D4 treatments but not significantly different from D1 and D2. Then D1 is significantly different from D3 and D4 but not significantly different from D2. D2 was significantly different from D3 and not significantly different from D4. D3 and D4 showed no significant difference. While the results of the tukey test on cell proliferation showed that each treatment was significantly different. The best results showed by giving combination therapy of doxorubicin 0.2 µg/mL and zodia extract 0.8 mg/ml which was characterized by a decrease in cyclin b1 expression and the lowest cell proliferation. So it can be concluded that combination therapy between doxorubicin and zodia extract can be used as anticancer therapy by inhibiting cyclin b1 expression and cell proliferation.

Item Type:	Thesis (Magister)
Identification Number:	042406
Divisions:	S2/S3 > Magister Ilmu Biomedis, Fakultas Kedokteran
Depositing User:	Unnamed user with username nova
Date Deposited:	09 Oct 2024 04:18
Last Modified:	09 Oct 2024 04:18
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/227155

Text Icha Nadhirotul Izza Afida.pdf Restricted to Registered users only Download (3MB)

Actions (login required)

View Item