Perbandingan Tanda Klinis dan Profil Serologis Lupus Eritematosus Sistemik pada Humanized Mice Model Of Lupus dan Model Mencit Lupus Induksi Pristane.

Airlangga, Dimas Ikhsan and Dr. dr. Hani Susianti, Sp.PK (K) and Prof. Dr. dr. Kusworini, M.Kes, Sp.PK (K) (2024) Perbandingan Tanda Klinis dan Profil Serologis Lupus Eritematosus Sistemik pada Humanized Mice Model Of Lupus dan Model Mencit Lupus Induksi Pristane. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Lupus Eritematosus Sistemik (LES) merupakan jenis penyakit autoimun yang memengaruhi banyak sistem organ. Lupus lebih sering terjadi pada wanita muda dan wanita usia subur dibandingkan pria. Angka kematian pasien LES dua kali lebih tinggi dibandingkan pasien tanpa LES. Patofisiologi penyakit LES melibatkan gangguan hilangnya toleransi imun pada individu dengan kerentanan genetik dan terpapar faktor lingkungan sehingga menyebabkan kondisi autoimun. Hal ini mengakibatkan peningkatan aktivitas pelepasan sitokin, aktivasi komplemen, dan produksi autoantibodi yang pada akhirnya menyebabkan kerusakan fungsional di berbagai jaringan organ. Belum ada penelitian baru yang menunjukkan tingkat efektivitas yang tinggi dalam pengobatan LES selama 20 tahun terakhir. Uji klinis dengan subjek manusia memiliki keterbatasan etis, sehingga peneliti cenderung menggunakan hewan coba. Model yang sering digunakan adalah adalah model pristane-induced lupus (PIL). Meskipun model ini berguna dalam penelitian mengenai mekanisme lupus akibat faktor lingkungan, namun model ini tidak dapat sepenuhnya menggambarkan kompleksitas patogenesis LES pada manusia sehingga hasil penelitian tidak dapat langsung diterapkan pada pasien. Maka diperlukan model mencit yang dimiripkan manusia (humanized) untuk meneliti sel manusia secara in vivo pada mencit. Model mencit lupus yang dimiripkan manusia dibuat dengan cara merekonstruksi sel manusia pada mencit. Model ini diharapkan dapat menghasilkan kelainan sistem imun yang menyerupai kelainan pada pasien LES sehingga memungkinkan penelitian dan pengembangan strategi pengobatan baru. Penelitian ini akan membandingkan perbedaan tanda klinis dan serologis lupus eritematosus sistemaik pada kelompok humanized mice model dan kelompok induksi pristane. Subjek penelitian adalah mencit balb/c (mus musculus). Penelitian ini bersifat eksperimental murni yang dilakukan di Laboratorium Pengembangan Hewan Coba (LPHC) FKUB dan Laboratorium Sentral RSSA dari Juni 2023 hingga Desember 2023. Kontrol (K1) yang digunakan adalah mencit balb/c (Mus musculus) sehat sebanyak 10. Kelompok mencit pristane (K2) (n=20) diberikan injeksi pristane 0,5 cc secara intraperitoneal. Kelompok mencit humanized (K3) (n=20) dibuat menjadi imunodefisiensi dengan pemberian injeksi CPA dan radiasi sinar gamma, lalu ditransplantasikan kultur sel punca hematopoetik dari pasien LES.Manifestasi klinis yang diamati meliputi tanda-tanda arthritis dan alopesia. Pengamatan manifestasi klinis dilakukan pada tiap minggu 12 hingga 16. Pada minggu ke- 16, mencit dilakukan terminasi untuk dilakukan pemeriksaan penanda serologis berupa ANA dan Anti-dsDNA. Variabel penelitian meliputi mencit yang ditransplantasikan sel punca pasien lupus dan mencit yang diinduksi pristane sebagai variabel bebas serta tanda klinis (arthritis dan alopesia) dan serologis (ANA dan Anti-dsDNA) sebagai variabel terikat. Analisis statistik dilakukan dengan mengunakan IBM SPSS Statistics. Uji komparatif antara parameter dilakukan dengan Kruskal-Wallis karena sebaran data tidak normal dengan derajat kepercayaan 95%. Hasil penelitian yaitu tidak ditemukan perbedaan waktu timbulnya tanda klinis antara kelompok mencit. Observasi pada kelompok induksi pristane memperlihatkan mencit yang sakit. Seluruh mencit (100%) dengan induksi pristane didapatkan tanda alopesia namun tidak ditemukan adanya arthritis (0%). Terdapat 20% mencit dengan edema/ascites pada abdomen kiri. Kelompok humanized mice model of lupus hanya didapatkan 15% dengan tanda klinis alopesia serta tidak ditemukan tanda arthritis (0%). Tidak ditemukan perbedaan waktu timbulnya ANA dan Anti-dsDNA antara kelompok. Hasil pemeriksaan antibodi menunjukkan bahwa rerata kadar ANA serum dalam kelompok penelitian adalah sebagai berikut: K1 adalah 9,192 ± 0,622 pg/ml, K2 adalah 13.661 ± 3,466 pg/ml, dan K3 adalah 16,944 ± 3,726 pg/ml ANA dalam serum. Didapatkan bahwa kadar serum ANA yang tertinggi pada kelompok humanized (K3) yang diikuti oleh kelompok pristane (K2) dan kontrol (K1). Uji Kruskal-Wallis menunjukkan hasil yang tidak signifikan antara masing-masing kelompok (p=0,156). Rerata kadar Anti-dsDNA menunjukkan K1 sebesar 61,380 ± 4,806 pg/ml, K2 sebesar 129,780 ± 42,631 pg/ml, dan K3 sebesar 224,998 ± 71,070 pg/ml dalam serum mereka. Model mencit lupus humanized (K3) juga memiliki tingkat Anti-dsDNA tertinggi daripada kelompok kontrol (K1) dan kelompok yang diinduksi pristane (K2). Hasil uji Kruskal-Wallis menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan antara masing-masing kelompok (p=0,061). Dari parameter tanda klinis dan antibodi lupus dapat disimpulkan bahwa model mencit induksi pristane masih menjadi pilihan terbaik sebagai model hewan coba LES.

English Abstract

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is a type of autoimmune disease that affects many organ systems. Lupus is more common in young women and women of childbearing age than men. The mortality rate of SLE patients is twice as high as that of patients without SLE. The pathophysiology of SLE involves impaired loss of immune tolerance in individuals with genetic susceptibility and exposure to environmental factors resulting in an autoimmune condition. This results in increased activity of cytokine release, complement activation, and autoantibody production which ultimately leads to functional damage in various organ tissues. There have been no new studies showing a high level of effectiveness in the treatment of SLE over the past 20 years. Clinical trials with human subjects have ethical limitations, so researchers tend to use experimental animals. A frequently applied model is the pristane-induced lupus (PIL) model. Although this model is useful in the study of lupus mechanisms due to environmental factors, it cannot fully describe the complexity of SLE pathogenesis in humans so the results of the study cannot be directly applied to patients. Therefore, a humanized mice model is needed to study human cells in vivo in mice. Humanized lupus mice models are made by reconstructing human cells in mice. This model is expected to produce immune system abnormalities that resemble those in SLE patients, enabling research and development of new treatment strategies. This study will compare the differences in clinical and serological signs of systemic lupus erythematosus in the humanized mice model group and the pristane induction group. The research subjects were Balb/c mice (Mus musculus). This study was a pure experimental study conducted at the Laboratory of Experimental Animal Development (LPHC) FKUB and RSSA Central Laboratory from June 2023 to December 2023. The control (K1) used was healthy balb/c mice (Mus musculus) as many as 10. The pristane mice group (K2) (n = 20) was given an injection of 0.5 cc pristane intraperitoneally. The humanized mice group (K3) (n=20) was made immunodeficient by giving CPA injection and gamma radiation, then transplanted with hematopoietic stem cell cultures from LES patients. Clinical manifestations observed included signs of arthritis and alopecia. Observation of clinical manifestations was carried out from week-12 to 16. At week 16, mice were terminated for examination of serological markers such as ANA and AntidsDNA. The study variables included stem cell-transplanted mice of lupus patients andviii pristane-induced mice as independent variables and clinical (arthritis and alopecia) and serological (ANA and Anti-dsDNA) signs as dependent variables. Statistical analysis was performed using IBM SPSS Statistics. Comparative tests between parameters were performed by Kruskal-Wallis because data was abnormally distributed with a 95% confidence level. The results showed no difference in the onset of clinical signs between groups of mice. Observations in the pristane induction group showed sick mice. All mice (100%) with pristane induction had signs of alopecia but no arthritis (0%). There were 20% of mice with edema/ascites on the left abdomen. There were 15% with clinical signs of alopecia and no signs of arthritis (0%) in the humanized mice model of lupus group. There was no difference in the time of onset of ANA and Anti-dsDNA antibodies between groups. The results of the antibody examination showed that the mean serum ANA levels in the study groups were as follows: K1 was 9.192 ± 0.622 pg/ml, K2 was 13.661 ± 3.466 pg/ml, and K3 was 16.944 ± 3.726 pg/ml ANA in serum. It was found that the highest serum levels of ANA antibodies were in the humanized group (K3) followed by the pristane group (K2) and control (K1). Kruskal-Wallis test showed non-significant results between each group (p=0.156). The mean Anti-dsDNA levels showed K1 at 61,380 ± 4,806 pg/ml, K2 at 129,780 ± 42,631 pg/ml, and K3 at 224,998 ± 71,070 pg/ml in their serum. The humanized lupus mice model (K3) also had the highest Anti-dsDNA level than the control group (K1) and the pristane-induced group (K2). The Kruskal-Wallis test results showed a nonsignificant difference between each group (p=0.061). From the parameters of clinical signs and lupus antibodies, it can be concluded that the pristane induction mice model is still the best choice as an SLE experimental animal model.

Item Type:	Thesis (Magister)
Identification Number:	0424060038
Divisions:	S2/S3 > Magister Ilmu Biomedis, Fakultas Kedokteran
Depositing User:	Unnamed user with username nova
Date Deposited:	16 Jul 2024 07:09
Last Modified:	11 Oct 2024 01:51
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/223566

Text DIMAS IKHSAN AIRLANGGA.pdf Download (1MB)

Actions (login required)

View Item