Pengaruh Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Anggur (Vitis vinifera) dan Cisplatin terhadap Ekspresi PPARγ dan Proliferasi Sel Kanker Serviks secara in vitro.

Munawarroh, Robiatul and Prof. Agustina Tri Endharti, S.Si., Ph.D and dr. Yahya Irwanto, Sp.OG (K) (2023) Pengaruh Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Anggur (Vitis vinifera) dan Cisplatin terhadap Ekspresi PPARγ dan Proliferasi Sel Kanker Serviks secara in vitro. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Kanker serviks merupakan pertumbuhan sel abnormal pada jaringan leher rahim, dimana sel permukaan (sel epitel) berkembang biak dan berubah sifat dari sel normal. Kanker serviks yang ganas ditandai dengan inisiasi pertumbuhan sel yang tidak terkendali, migrasi dan invasi jaringan sekitarnya, serta penyebaran (metastasis) ke bagian tubuh yang lain. Patogenesis kanker serviks disebabkan oleh infeksi persisten dengan tipe risiko tinggi (HR) - Human Papilloma Virus (HPV). Kanker serviks di Indonesia disebabkan oleh dua jenis HPV (Human Papilloma Virus), yaitu tipe 16 dan 18. Penetrasi HPV ke dalam lapisan sel epitel akibat luka kecil. Jika berhasil menempel pada sel epitel serviks melalui reseptornya, virus akan diendositosis dan masuk ke dalam sel. Setelah berhasil memasuki sel, virus dilepaskan dari selubungnya, setelah itu virus memulai proses replikasi dengan mengambil alih sistem transkripsi dan translasi sel inang. Protein E6 dan E7 berperan penting dalam hal ini, karena keberadaan kedua protein ini mencegah aktivitas protein penekan tumor p53 dan pRb (protein retinoblastoma), menyebabkan sel menjadi abadi dan pembelahan sel menjadi tidak terkendali. Jika proses ini terakumulasi tanpa berhasil dihilangkan oleh sistem kekebalan tubuh, infeksi virus HPV dapat menjadi permanen dan tumor ganas berupa kanker serviks dapat berkembang. Terapi pengobatan pada sel kanker serviks bekerja secara spesifik pada perbaikan DNA (asam deoksiribonukleat). Cisplatin bekerja sebagai anti kanker dengan cara menempel pada DNA (asam deoksiribonukleat) sel kanker dan mencegah pertumbuhannya. Agen kemoterapi dapat diberikan secara oral, intravena, subkutan, intramuscular, intratekal. Sebagian besar agen kemoterapi adalah IV karena tingkat penyerapan 100%. Sebagian besar agen kemoterapi dimetabolisme dan diekskresikan oleh hati atau ginjal. Ekstrak daun anggur yang mengandung senyawa polifenol yang dapat memodulasi jalur pensinyalan yang terlibat dalam karsinogenesis pada berbagai kanker. MAPK juga terlibat dalam regulasi terkoordinasi yang digerakkan oleh redoks dari faktor nuklir-kappa B (NF-κB) dan faktor nuklir 2 terkait E2 (Nrf2). Polifenol menunjukkan aktivitas yang kuat dalam mempengaruhi faktor transkripsi faktor nuklir κappa B (NF-κB) dan aktivasi Peroxisome Proliferator Activator Receptor gamma (PPARγ). Mekanisme kerja PPARγ secara fisik berinteraksi dengan berbagai faktor transkripsi, seperti faktor nuklir teraktivasi kappa B (NFkB) dan protein aktivator 1 (AP-1), yang menghambat ekspresi gen proinflamasi melalui mekanisme transrepresif. dengan cara DNAindependen. Senyawa Fenol yang berada dalam ekstrak daun anggur merupakan metabolit sekunder yang penting sebagai agen antikanker potensial. Senyawa Fenol juga menjanjikan agen antikanker sitotoksik yang mempromosikan apoptosis, mengurangi proliferasi, dan menargetkan berbagai aspek kanker (angiogenesis, pertumbuhan dan diferensiasi, dan metastasis). Dalam peradangan dan keganasan. Efek karsinogenik senyawa fenolik menghambat pensinyalan onkogenik proliferasi sel, angiogenesis, dan menginduksi apoptosis. Senyawa fenolik juga memodulasi kadar ROS dan kaskade pro dan anti-inflamasi, mempromosikan transkripsi protein penekan tumor seperti p53, dan berkontribusi pada diferensiasi sel dan perkembangan yang tepat. Ekstrak daun anggur juga berpotensi mengurangi efek samping dari beberapa obat kemoterapi. Cisplatin dikombinasikan dengan senyawa polifenol untuk menekan efek samping cisplatin. Tujuan dari kombinasi ini adalah untuk mengurangi dosis dan efek samping obat kemoterapi serta bekerja secara sinergis untuk meningkatkan efektivitas pengobatan. vi Penelitian ini menggunakan desain penelitian experimental dengan post test only with control group design. Sampel yang di gunakan ialah sel HeLa, merupakan koleksi laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Kelompok Sampel di bagi menjadi 6 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif, kontrol positif (Cisplatin dosis 5 μg/ml) dan 4 kelompok perlakuan yaitu dosis kombinasi 2,5, 5 dan 10 μg/ml ekstrak etanol a daun anggur di tambah Cisplatin 5 μg/ml dan dosis tunggal 20 μg/ml ekstrak daun anggur. Terapi yang ditargetkan melibatkan antibodi primer PPARγ. Efek antikanker ekstrak daun anggur (2,5, 5 dan 10 μg/ml) dipelajari melalui uji fitokimia / senyawa aktif daun anggur, uji peningkatan ekspresi PPARγ menggunakan metode imunofloresence dan uji proliferasi MTT Asssay yang dilakukan secara in vitro. Ekstrak daun anggur menghambat proliferasi sel kanker serviks, dibuktikan dengan uji aktivitas sitotoksisitas yang signifikan dari uji MTT pada ekstrak daun anggur (Vitis vinivera) 10 μg/ml + Cis. Ekstrak daun anggur mampu meningkatkan ekspresi PPARγ. Pada penelitian ini, hasil immunofloresence menunjukkan bahwa ekspresi PPARγ (Peroxisome Proliferator Activator Receptor gamma) meningkat secara signifikan pada ekstrak daun anggur 10 μg/ml + Cis. Ekstrak gabungan terbukti lebih efektif daripada ekstrak tunggal (Cis) (p<0,05). Ekstrak Daun Anggur dinilai sebagai agen anti kanker. Pemberian cisplatin dengan senyawa bahan aktif polifenol (fenolik) dapat menghambat proliferasi sel kanker serviks. Terapi kombinasi cisplatin dan ekstrak daun anggur terbukti menghambat kelangsungan hidup Sel Hela.

English Abstract

Cervical cancer is an abnormal cell growth in cervical tissue, where surface cells (epithelial cells) multiply and change the nature of normal cells. Malignant cervical cancer is characterized by the initiation of uncontrolled cell growth, migration and invasion of surrounding tissues, and spread (metastasis) to other parts of the body. The pathogenesis of cervical cancer is caused by persistent infection with a high-risk type (HR) - human papilloma virus (HPV). Cervical cancer in Indonesia is caused by two types of HPV (Human Papilloma Virus), namely types 16 and 18. Penetration of HPV into the epithelial cell layer due to small wounds. If it successfully attaches to cervical epithelial cells through its receptors, the virus will be endocytosed and enter the cells. After successfully entering the cell, the virus is released from its sheath, after which the virus begins the replication process by taking over the transcription and translation system of the host cell. E6 and E7 proteins play an important role in this, as the presence of these two proteins prevents the activity of tumor suppressor proteins p53 and pRb (retinoblastoma proteins), causing cells to become immortal and cell division to become uncontrolled. If this process accumulates without being successfully eliminated by the immune system, HPV virus infection can become permanent and malignant tumors in the form of cervical cancer can develop. Treatment therapy in cervical cancer cells works specifically on DNA repair (deoxyribonucleic acid). Cisplatin works as an anti-cancer by attaching to the DNA (deoxyribonucleic acid) of cancer cells and preventing their growth. Chemotherapeutic agents can be administered orally, intravenously, subcutaneously, intramuscularly, intrathecally. Most chemotherapeutic agents are IV due to a 100% absorption rate. Most chemotherapeutic agents are metabolized and excreted by the liver or kidneys. Grape leaf extract contains polyphenolic compounds that can modulate signaling pathways involved in carcinogenesis in various cancers. MAPK is also engaged in coordinated redox-driven regulation of nuclear factor-kappa B (NF-κB) and related nuclear factor 2 E2 (Nrf2). Polyphenols show strong activity in influencing nuclear factor transcription factor κappa B (NF-κB) and Peroxisome Proliferator Activator Receptor gamma (PPARγ). The mechanism of action of PPARγ physically interacts with various transcription factors, such as kappa B activated nuclear factor (NFkB) and activator protein 1 (AP-1), which inhibit proinflammatory gene expression through transrepressive mechanisms. in a DNA-independent way. Phenol compounds present in grape leaf extract are important secondary metabolites as potential anticancer agents. Phenol compounds also hold promise as cytotoxic anticancer agents that promote apoptosis, reduce proliferation, and target various aspects of cancer (angiogenesis, growth and differentiation, and metastasis). In inflammation and malignancy. Carcinogenic effects of phenolic compounds inhibit oncogenic signaling of cell proliferation, angiogenesis, and induce apoptosis. Phenolic compounds also modulate ROS levels and are pro- and anti-inflammatory cascades, promote transcription of tumor suppressor proteins such as p53, and contribute to cell differentiation and proper development. Grape leaf extract also has the potential to reduce the side effects of some chemotherapy drugs. Cisplatin is combined with polyphenolic compounds to suppress cisplatin side effects. The goal of this combination is to reduce the dose and side effects of chemotherapy drugs and work synergistically to increase the effectiveness of treatment. This study used an experimental research design with post test only with control group design. The sample used is HeLa cells, a collection of the Parasitology laboratory, Faculty of Medicine, Universitas Brawijaya. The sample group was divided into 6 groups, namely the negative control group, positive control (Cisplatin dose 5 μg / ml) and 4 treatment groups namely a combination dose of 2.5, 5 and 10μg / ml ethanol extract a viii grape leaf plus Cisplatin 5 μg / ml and a single dose 20 μg / ml grape leaf extract. Targeted therapy involves the primary antibody PPARγ. The anticancer effects of grape leaf extract (2.5, 5 and 10 μg/ml) were studied through phytochemical tests / active compounds of grape leaves, PPARγ expression enhancement test using immunofloresence method and MTT Asssay proliferation test conducted in vitro. Grape leaf extract inhibited the proliferation of cervical cancer cells, evidenced by a significant cytotoxicity activity test from the MTT test on grape leaf extract (Vitis vinivera) 10 μg/ml + Cis. Grape leaf extract was able to increase the expression of PPARγ. In this study, immunofloresence results showed that PPARγ (Peroxisome Proliferator Activator Receptor gamma) expression increased significantly in grape leaf extract 10 μg/ml + Cis. The combined extract proved to be more effective than the single extract (Cis) (p<0.05). Grape Leaf Extract is rated as an anti-cancer agent. Giving cisplatin with polyphenolic active ingredient compounds (phenolics) can inhibit the proliferation of cervical cancer cells. Combination therapy of cisplatin and grape leaf extract was shown to inhibit the survival of Hela Cells.

Item Type:	Thesis (Magister)
Identification Number:	0423060102
Subjects:	600 Technology (Applied sciences) > 618 Gynecology, obstetrics, pediatrics, geriatrics > 618.2 Obstetrics
Divisions:	S2/S3 > Magister Kebidanan, Fakultas Kedokteran
Depositing User:	Endang Susworini
Date Deposited:	12 Dec 2023 08:22
Last Modified:	12 Dec 2023 08:22
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/205289

Text (DALAM MASA MEMBARGO) Robiatul Munawaroh.pdf Restricted to Registered users only until 31 December 2025. Download (2MB)

Actions (login required)

View Item