Optimasi Konsentrasi Nisin dan Lama Inkubasi untuk Induksi Ekspresi Protein Spike HCR pada Karier Lactococcus lactis

Mubarak, Termidzi Husni and apt. Oktavia Rahayu Adianingsih, S, . Farm., M. Biomed and Dr. apt. Valentina Yurina,, S. Si., M. Si (2022) Optimasi Konsentrasi Nisin dan Lama Inkubasi untuk Induksi Ekspresi Protein Spike HCR pada Karier Lactococcus lactis. Sarjana thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) menjadi permasalahan yang serius untuk dihadapi akibat dari infeksi SARS-CoV-2. Infeksi dari SARS-CoV-2 dapat menimbulkan beragam gejala dari ringan hingga parah pada setiap orang. Kebutuhan untuk segera melaksanakan vaksinasi terutama vaksin mukosal (secara oral ataupun intranasal) yang aman dan mudah diberikan serta bersifat less-invasive untuk semua kalangan usia menjadi fokus utamanya. Protein HCR merupakan salah satu gen dari protein S2 SARS-CoV-2 yang bersifat antigenik dan dimiliki oleh berbagai galur coronavirus. Bakteri L. lactis yang telah dimodifikasi secara genetik untuk membawa protein HCR dari SARS-CoV-2 menjadi kandidat vaksin mukosal untuk COVID-19. Nisin memiliki kemampuan untuk meregulasi sistem ekspresi gen/ protein pada bakteri Gram positif secara efektif dengan konsentrasi nanogram per mililiter (ng/ mL). Penelitian ini bertujuan untuk menentukan konsentrasi nisin dan lama inkubasi yang optimal untuk menginduksi ekspresi protein HCR pada karier bakteri rekombinan L. lactis NZ3900/pNZ8149-HCR. Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu desain penelitian eksperimen dengan menggunakan konsentrasi nisin antara 0-40 ng/ mL dan lama inkubasi 3-24 jam dengan kontrol negatif (KN) bakteri NZ3900. Bakteri kontrol dan rekombinan dibiakkan pada media M17B hingga mencapai OD600 ±0,8 sebelum dilakukan induksi berbagai konsentrasi nisin. Protein HCR pada lisat sel bakteri yang didapatkan setelah pemanenan kemudian menggunakan ELISA dan WB secara kuantitatif dan kualitatif. Hasil penelitian menunjukkan peningkatan konsentrasi protein HCR yang signifikan (ANOVA, p<0,05) pada konsentrasi 40 ng/ mL dibandingkan dengan kelompok KN dan konsentrasi 10 dan 20 ng/ mL. Identifikasi menggunakan WB menunjukkan adanya pita protein dengan ukuran ~23 kDa dengan intensitas tertinggi ditunjukkan oleh pemberian nisin konsentrasi 40 ng/ mL dan lama inkubasi 9 jam. Penggunaan nisin untuk menginduksi ekspresi protein HCR secara optimal pada bakteri rekombinan L. lactis NZ3900/pNZ8149-HCR didapatkan dengan menggunakan konsentrasi 40 ng/ mL dan inkubasi selama 9 jam.

Item Type:	Thesis (Sarjana)
Identification Number:	0522060102
Uncontrolled Keywords:	COVID-19, vaksin mukosal, nisin, L. lactis, live bacterial vector
Subjects:	600 Technology (Applied sciences) > 615 Pharmacology and therapeutics > 615.1 Drugs (materia medica)
Divisions:	Fakultas Kedokteran > Farmasi
Depositing User:	Budi Wahyono Wahyono
Date Deposited:	16 Sep 2022 07:21
Last Modified:	19 Sep 2022 01:13
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/194329

Text (DALAM MASA EMBARGO) Termidzi Husni Mubarak.pdf Restricted to Registered users only until 31 December 2024. Download (3MB)

Actions (login required)

View Item