Pengaruh Ekstrak Etanol Kacang Tunggak (Vigna unguiculata) terhadap Penurunan Kadar Malondialdehyde dan Ekspresi Amyloid β pada Otak Tikus Putih (Rattus norvegicus) Model Ovariektomi

Lestary, Tanti Tri and Dr. dr. I Wayan Arsana Wiyasa,, SpOG(K) and Dr. dr. Dwi Yuni Hidayati,, M.Kes (2021) Pengaruh Ekstrak Etanol Kacang Tunggak (Vigna unguiculata) terhadap Penurunan Kadar Malondialdehyde dan Ekspresi Amyloid β pada Otak Tikus Putih (Rattus norvegicus) Model Ovariektomi. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Menopause dapat menyebabkan terjadinya penurunan kualitas hidup dan menimbulkan masalah kesehatan. Keadaan menopause memiliki efek samping jangka panjang salah satunya adalah Demensia yang didominasi penyakit Alzheimer. Pada tahun 2016 terdapat 700.000 jumlah kematian yang diakibatkan oleh penyakit Alzheimer. Berkurangnya hormone estrogen pada masa menopause dipercaya menjadi pemicu terjadinya Stres Oksidatif pada otak yang menyebabkan kerusakan sel neuron hingga terjadinya Alzheimer. Stress Oksidatif terjadi ketika produksi Reactive Oxygen Specie (ROS) yang dihasilkan mitokondria otak tidak diimbangi dengan produksi antioksidan sebagai penangkalnya. Stress Oksidatif yang terjadi pada otak dapat di tandai dengan meningkatnya Peroksidasi Lipid yang menghasilkan Malondialdehyde. ROS merupakan senyawa yang sangat reaktif yang dapat merusak protein, DNA, dan lipid seperti Polyunsaturated Fatty Acids (PUFA). Peroksidasi lipid terjadi saat radikal bebas seperti OH● menyerang Hidrogen dari Fatty Acid (LH) dan menghasilkan Radical Lipid (L●). Selanjutya L● yang bereaksi dengan molekul O2 dan membentuk Radical Peroxyl Lipid (LOO●). LOO● melalui reaksi siklisasi untuk membentuk endoperoksida, yang akhirnya membentuk MDA Alzheimer merupakan penyakit yang disebabkan adanya penumpukkan peptida Amyloid β yang membentuk plak di dalam otak yang mengganggu fungsi synaps dan mengakibatkan kematian neuron. Amyloid β dipercaya dapat memicu terjadinya kerusakan membran sel sehingga mengganggu keseimbangan Ca2+ pada mitokondria. Hal ini dapat menginduksi produksi ROS yang berlebihan dan menyebabkan terjadinya kerusakan sel neoron yang menyebabkan terjadinya Alzheimer. Berkurangnya hormon estrogen pada wanita menopause mengakibatkan berkurangnya antioksidan endogen yang dapat mencegah terjadinnya keruskan sel neuron yan diinduksi oleh peningkatan ROS. Hormon estrogen memiliki kemampuan dalam menginduksi produksi antioksidan endogen yang diperlukan untuk mencegah terjadinya Stress Oksidatif. Obat-obatan yang diberikan pada penderita Alzheimer memikliki efek samping yang tidak diharapkan seperti insomnia, gastritis dan lainnya. Kacang Tunggak merupakan tanaman yang mengandung senyawa fitoestrogen yang didominasi jenis genistein. Genistein memiliki kemiripan struktural dengan estrogen endogen. Genistein membantu meningkatkan ekspresi enzim antioksidan secara alami, sehingga ROS dapat dinonaktifkan. Sehingga diharapkan dapat mencegah terjadinya Stress Oksidatif yang dapat menyebabkan Alzheimer pada wanita meopause. Tujuan penelitian ini untuk membuktikkan ekstrak ethanol Kacang Tunggak (Vigna unguiculata) dapat menurunkan kadar Malondialdehyde (MDA) dan ekspresi Amyloid β pada otak tikus putih (Rattus norvegicus) tua model ovariektomi. Metode yang digunakan adalan eksperimental post test control design. Sampel yang digunakan adalah tikus (Rattus norvegicus) betina yang dikondisikan hipoestrogen dengan tindakan ovariektomi sehingga menyerupai kedaan menopause. Jumlah replikasi pada penelitian ini adalah 6 replikasi dengan 1 kelompok kontrol positif, 1 kelompok kontrol negatif 1 kelompok estradiol, 1 kelompok dengan pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak dosis 1,25mg/kgbb/hari, 1 kelompok dengan pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak dosis 2.5 mg/kgbb/hari, dan 1 kelompok dengan pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak dosis 5mg/kgbb/hari. Kadar MDA di ukur dengan ELISA dan ekspresi Amyloid β di ukur dengan pengamatanvii Immunofluorescence. Analisis data secara statistik menggunaka One Way Anova yang dilanjutkan dengan Multiple Comparisson berupa Least Significant Different (LSD). Hasil uji Shapiro-Wilk untuk normalitas data diperoleh bahawa kadar MDA dan ekspresi Amyloid β untuk masing-masing kelompok pengamatan telah menunjukkan pvalue yang kesemuanya memiliki nilai lebih esar dari taraf signifikansi α = 0.005, Jadi semua data telah memenuhi uji prasyarat parametrik. Berdasarkan hasil uji perbandingan berganda sengan uji LSD menunjukkan bahwa ada terjadi peningkatan rerata kadar MDA kelompok kontrol negatif (tanpa ovariektomi) (3.18±0.018) ke kelompok kontrol positif (dengan ovariektomi)(3.38±0.204). adanya perbedaan yang bermakna rerata kadar MDA otak antara kelompok kontrol positif (Rattus norvegicus hipoestrogen) (3.38±0.204a) dengan kelompok perlakuan pemberian estradiol dosis 0.18 mg/kg/BB/hr (3.07±0.208bc) ,kelompok perlakuan 1 dengan pemeberian ekstrak ethanol kacang tunggak dengan dosis 1.25 mg/kg BB/hr (3.11±0.164bc), kelompok perlakuan 2 dengan pemeberian ekstrak ethanol kacang tunggak dengan dosis 2.5 mg/kg BB/hr (3.09±0.148bc), dan kelompok perlakuan 3 dengan pemebrian ekstrak ethanol kacang tunggak dengan dosis 5 mg/kg BB/hr (2.86±0.142c). Hal ini berarti ada pengaruh dari perlakuan pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak berbagai dosis berupa penurunan kadar MDA. Melalui uji Pearson yang dilakukan untuk mengetahui keeratan hubungan antara pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak dengan kadar MDA otak di dapatkan keeratan yang bermakna dengan p-value lebih kecil dari taraf signifikansi α = 0.05 (p value 0.002). Keeratan hubungan antara pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak dengan kadar MDA otak dalam kategori kolerasi yang kuat (-0.707). Berdasarkan hasil uji perbandingan berganda sengan uji LSD ada perbedaan yang bermakna rerata kadar MDA antara kelompok kontrol positif (tikus yang di ovariektomi) (9.2±2.52a) dengan perlakuan perlakuan pemberian ekstrak ethanol kacang tunggak dosis 1.25 mg/kgBB/hari (4.84±1.85b), 2.5 mg/kgBB/hari (3.1±1.62bc), dan 5 (1.01±0.44c) mg/kgBB/hari. Hal ini berarti bahwa perlakun pemberian ekstrak etanol kacang tunggak dosis 1.25/kgBB/hari mg, 2.5 mg/kgBB/hari, dan 5 mg/kgBB/hari memiliki pengaruh terhadap ekspresi Amyloid β. Sehingga dapat dikatakan bahwa perlakuan pemberian ekstrak etanol kacang tunggak berbagai dosis berpengaruh bermakna terhadap penurunan ekspresi Amyloid β pada otak tikus putih tua yang di ovariektomi. Dapat disimpulkan bahwa pemberian ethanol kacang tunggak dalam berbagai dosis dapat menurunkan kadar MDA dan ekspresi Amyloid β pada otak tikus tua (Rattus norvegicus) yang di ovariektomi

English Abstract

Menopause can cause a decrease in quality of life and cause health problems. The state of menopause has long-term side effects, one of which is dementia, which is dominated by Alzheimer's disease. In 2016 there were 700,000 deaths due to Alzheimer's disease. The decrease in the hormone estrogen during menopause is believed to be a trigger for oxidative stress in the brain that causes neuronal cell damage to the onset of Alzheimer's. Oxidative stress occurs when the production of Reactive Oxygen Specie (ROS) produced by brain mitochondria is not matched by the production of antioxidants as an antidote. Oxidative stress that occurs in the brain can be characterized by increased lipid peroxidation which produces malondialdehyde. ROS are highly reactive compounds that can damage proteins, DNA, and lipids such as Polyunsaturated Fatty Acids (PUFA). Lipid peroxidation occurs when free radicals such as OH attack Hydrogen from Fatty Acid (LH) and produce Radical Lipid (L●). Furthermore, L● reacts with O2 molecules and forms Radical Peroxyl Lipid (LOO●). LOO● undergoes a cyclization reaction to form endoperoxides, which ultimately form MDA . Alzheimer's disease is a disease caused by a build-up of amyloid peptide that forms plaques in the brain that disrupt synapse function and result in neuronal death. Amyloid is believed to trigger cell membrane damage so that it disrupts the balance of Ca2+ in mitochondria. This can induce excessive ROS production and cause neuronal cell damage that causes Alzheimer's. Reduced estrogen hormone in postmenopausal women results in reduced endogenous antioxidants that can prevent neuronal cell damage induced by increased ROS. The hormone estrogen has the ability to induce the production of endogenous antioxidants needed to prevent oxidative stress. Drugs given to people with Alzheimer's have unwanted side effects such as insomnia, gastritis and others. Cowpea is a plant that contains phytoestrogen compounds which are dominated by genistein. Genistein has structural similarities to endogenous estrogens. Genistein helps increase the expression of antioxidant enzymes naturally, so that ROS can be deactivated. So it is hoped that it can prevent the occurrence of oxidative stress that can cause Alzheimer's in menopausal womenThe purpose of this study was to prove that cowpea (Vigna unguiculata) ethanol extract could reduce malondialdehyde (MDA) levels and amyloid expression in the brains of old white rats (Rattus norvegicus) ovariectomized model. The method used is experimental post test control design. The samples used were female rats (Rattus norvegicus) which were conditioned by hypoestrogen by ovariectomy so that they resembled menopause. The number of replications in this study were 6 replications with 1 positive control group, 1 negative control group, 1 estradiol group, 1 group receiving cowpea ethanol extract at a dose of 1.25 mg/kg/day, 1 group receiving 2.5 mg cowpea ethanol extract. /kgbw/day, and 1 group with cowpea ethanol extract at a dose of 5mg/kgbw/day. MDA levels were measured by ELISA and Amyloid expression was measured by immunofluorescence observation. Statistical data analysis using One Way Anova followed by Multiple Comparisson in the form of Least Significant Different (LSD). The results of the Shapiro-Wilk test for data normality showed that MDA levels and Amyloid expression for each observation group had shown p-values, all of which had values greater than the significance level α= 0.005, so all data had met the parametric prerequisite test. Based on the results of the multiple comparison test with the LSD test, it showed that there was an increase in the mean MDA levels of the negative control group (without ovariectomy) (3.18±0.018) to the positive control group (with ovariectomy) (3.38±0.204). there was a significant difference in the mean brain MDA levels between the positive control group (Rattus norvegicus hypoestrogen) (3.38±0.204a) and the treatment group given estradiol at a dose of 0.18 mg/kg/BW/day (3.07±0.208bc), treatment group 1 was given theix extract. cowpea ethanol at a dose of 1.25 mg/kg BW/day (3.11±0.164bc), treatment group 2 was given cowpea ethanol extract at a dose of 2.5 mg/kg BW/day (3.09±0.148bc), and treatment group 3 was given cowpea ethanol extract at a dose of 5 mg/kg BW/day (2.86±0.142c). This means that there is an effect of the treatment of cowpea ethanol extract in various doses in the form of a decrease in MDA levels. Through the Pearson test conducted to determine the close relationship between cowpea ethanol extract and brain MDA levels, it was found that there was a significant closeness with a p-value smaller than the significance level α = 0.05 (p value 0.002). The close relationship between cowpea ethanol extract and brain MDA levels was in the category of a strong correlation (-0.707). Based on the results of the multiple comparison test with the LSD test, there was a significant difference in the mean MDA levels between the positive control group (ovariectomized rats) (9.2±2.52a) and the treatment with cowpea ethanol extract at a dose of 1.25 mg/kgBW/day (4.84±1.85). b), 2.5 mg/kgBW/day (3.1±1.62bc), and 5 (1.01±0.44c) mg/kgBW/day. This means that the treatment of cowpea ethanol extract at doses of 1.25/kgBW/day mg, 2.5 mg/kgBW/day, and 5 mg/kgBW/day had an effect on the expression of Amyloid . So it can be said that the treatment of cowpea ethanol extract in various doses had a significant effect on the decrease in amyloid expression in the brains of old white rats that were ovariectomized. It can be concluded that the administration of cowpea ethanol in various doses can reduce MDA levels and Amyloid expression in the brains of old rats (Rattus norvegicus) that were ovariectomized

Item Type:	Thesis (Magister)
Identification Number:	042106
Subjects:	600 Technology (Applied sciences) > 618 Gynecology, obstetrics, pediatrics, geriatrics > 618.2 Obstetrics
Divisions:	S2/S3 > Magister Kebidanan, Fakultas Kedokteran
Depositing User:	Sugeng Moelyono
Date Deposited:	05 Jan 2022 07:07
Last Modified:	24 Feb 2022 08:12
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/187891

Text (DALAM MASA EMBARGO) Tanti Tri Lestary.pdf Restricted to Registered users only until 31 December 2023. Download (4MB)

Actions (login required)

View Item