Sari, Dita Kartika (2018) Pengaruh Vaksin Kinoid Il-17a Terhadap Titer Antibodi Anti Il-17a Dan Jumlah Sel Th 17 Limpa Pada Mencit Model Lupus Eritematosus Sistemik. Magister thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Lupus Eritematosus Sistemik (LES) adalah penyakit keradangan sistemik, yang disebabkan oleh respon imunitas tubuh yan berlebih. Seperti ciri dari penyakit autoimun pada umumnya, pada penyakit LES juga ditemukan antibodi terhadap antigen tubuh sendiri, seperti Anti Nuclear Antibodi (ANA). Antibodi yang terbentuk secara masif dalam tubuh, dan clearens yang buruk akan memicu terjadinya kompleks imun yang dapat terdeposit pada berbagai tempat ditubuh. Keradangan terus menerus oleh banyaknya kompleks imun yang terjadi akan meningkatkan respon imun tubuh yang lain, sehingga membuat keadaan yang terjadi seperti lingkaran setan. Salah satu interleukin yang berperan besar dalam patogenesis penyakit LES adalah sitokin hasil produksi salah satu subset baru dari sel T helper, yaitu Th 17 yang memproduksi Interleukin-17A (IL-17A). IL-17A yang merupakan sitokin proinflamasi yang poten dapat menyebabkan karakteristik tertentu dari LES, yaitu menginduksi inflamasi vaskular, rekruitmen leukosit dengan meningkatkan produksi lokal dari kemokin, hingga aktivasi sel B dan produksi autoantibodi. Dari efek yang ditimbulkan oleh IL-17A pada penyakit LES ini, maka timbul ide dalam mengembangkan terapi yang dapat menghambat mekanisme IL-17A dalam patogenesis LES. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek dari pemberian vaksin kinoid IL-17A yang berifat non-toksik namun imunogenik dalam memicu terbentuknya antibodi alamiah anti IL-17A yang mampu menetralisir dan meregulasi fungsi sitokin IL-17A yang berlebihan tersebut, sehingga dapat memperbaiki regulasi sistem imun pada penyakit LES. Metode penelitian yang digunakan adalah True Experimental Animal Design dengan The Post Test only Control Group. Menggunakan mencit Balb/c betina yang diberikan injeksi pristane secara intraperitoneal dosis tunggal sebanyak 0.5 ml dan diinkubasi selama 8 minggu untuk menunggu manifestasi LES. Kemudian IL-17A di coupling dengan protein carrier keyhole limpet hemocyanin (KLH) dan diberikan pada mencitdengan tiga dosis perlakuan yaitu : P1 (125 μg/ml), P2 (250 μg/ml), and P3 (500 μg/ml). Vaksin diberikan tiga kali dengan interval 3 minggu sejak minggu ke-8 pasca induksi pristane. Th17 diukur menggunakan flow cytometry; antibodi anti-IL-17A diukur menggunkan indirect ELISA. Dalam penelitian ini didapatkan hasil bahwa titer antibodi anti IL-17A berbeda secara bermakna pada hari ke-60 dari setiap kelompok perlakuan dengan p=0.000. Sementra antibodi anti IL-17A tertinggi pada hari ke-60 didapatkan pada kelompok P1 (3.181 ± 0.02 μg / ml), yang berbeda secara signifikan dengan kelompok KP (3.089 ± 0.01 μg / ml) dengan p = 0.000. Kelompok KP merupakan kelompok dengan rata rata persentase sel Th17 tertinggi (0.57 ± 0.37%). Persentase sel Th17 ini didapatkan menurun pada kelompok P1 (0.14 ± 0.96%) yang mendapatkan injeksi vaksin dosis 125 μg / ml dengan p = 0.045. Berdasarkan hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa imunisasi aktif IL-17A yang di coupling dengan KLH dapat menginduksi titer antibodi anti IL-17A yang dapat menetralisasi IL-17A, dan menurunkan jumlah sel Th17 jaringan limpa.
English Abstract
Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is a systemic inflammatory disease, caused by excessive body immune responses. As characteristic of autoimmune disease in general, in SLE also found antibodies against self antigens, such as Anti Nuclear Antibodies (ANA). Antibodies that are massively formed in the body, and bad clearens will trigger the immune complex that can be deposited in various places in the body. Constant inflammation by the many immune complexes that occur will increase the other immune responses, thus creating a state that occurs like a vicious cycle. One of the interleukins believed to play a major role in the pathogenesis of SLE is the cytokine produced by a new subset of helper T cells, the Th 17 that produces Interleukin-17A (IL-17A). IL-17A, which is a potent pro-inflammatory cytokine, can cause certain characteristics of LES, which induce vascular inflammation, leukocyte recruitment by increasing local production of chemokines, to B cell activation and autoantibody production. From the effects of IL-17A on LES disease, ideas arise in developing therapies that may inhibit IL-17A mechanisms in the pathogenesis of SLE. The purpose of this study was to determine the effect of non-toxic but immunogenic IL-17A kinoid vaccine in triggering the formation of a natural anti-ILA 17 antibody capable of neutralizing and regulating the function of excessive IL-17A cytokines, thus improving the regulation of the system immune to SLE. Female Balb/c mice were given single intraperitoneal injection of 0.5 ml pristane and incubated 8 weeks to manifested as SLE. IL-17A was coupled to keyhole limpet hemocyanin (KLH) and given to mice in three different doses: P1 (125 μg/ml), P2 (250 μg/ml), and P3 (500 μg/ml). The vaccine was given three times with three weeks interval start from 8th weeks after pristane induction. Th17 were measured by flow cytometry; anti-IL-17A antibody titers were measured by ELISA. In this study we found out that antibody titer of IL-17A complex have been statistically different in the day of 60 with p=0.000. While the highest antibody titer on day 60 were found in the P1 group (3.181 ± 0.02 μg / ml), which also differed significantly with the KP group (3.089 ± 0.01 μg / ml) with p = 0.000. The KP group, has the highest average percentage of Th17 cells of 0.57 ± 0.37%. The percentage of Th17 cells was significantly decreased from the KP group when compared to the P1 group (0.14 ± 0.96%) who received injection of IL-17A kinoid vaccine at a dose of 125 μg / ml with p = 0.045. Based on these results, it can be concluded that active immunization of IL-17A coupled to KLH was able to induce a high titer of neutralizing antibody against IL-17A and decrease Th17 cell persentage in spleen
Other obstract
-
| Item Type: | Thesis (Magister) |
|---|---|
| Identification Number: | TES/616.77/SAR/p/2018/041802327 |
| Uncontrolled Keywords: | DISEASES, LIBMAM - SACKS DISEASE, SYSTEMIE LUPUS ERYTHEMATOSUS |
| Subjects: | 600 Technology (Applied sciences) > 616 Diseases > 616.7 Diseases of musculoskeletal system > 616.77 Diseases of connectives tissues |
| Divisions: | S2/S3 > Magister Ilmu Biomedis, Fakultas Kedokteran |
| Depositing User: | Endang Susworini |
| Date Deposited: | 22 Nov 2019 04:41 |
| Last Modified: | 19 Dec 2019 04:45 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/176018 |
Actions (login required)
 |
View Item |