Nugrahini, NurIdaPanca (2011) Isolasi, Uji Aktivitas, dan Purifikasi Parsial Senyawa Antibiotik dari Isolat Jamur dan Aktinomisetes Tanah Kalimantan Timur. Magister thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk melakukan isolasi, uji aktivitas, dan purifikasi parsial ekstrak antibiotik dari jamur dan aktinomisetes tanah Kalimantan Timur serta mendapatkan hasil identifikasi isolat jamur dan aktinomisetes tersebut secara morfologi dan molekuler. Tahapan awal dari penelitian ini adalah proses fermentasi yang dilakukan terhadap 25 isolat jamur dan 25 isolat aktinomisetes tanah sehingga dihasilkan metabolit hasil fermentasi yang diperkirakan mengandung senyawa antibiotik. Kemudian dilakukan proses ekstraksi untuk mengisolasi senyawa antibiotik tersebut. Langkah selanjutnya adalah pengujian aktivitas ekstrak antibiotik terhadap beberapa mikroba uji yaitu Staphylococcus aureus , Bacillus subtilis , Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , Candida albican , dan Aspergillus niger . Ekstrak yang menunjukkan aktivitas penghambatan tertinggi selanjutnya dipurifikasi dengan menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT), HPLC analitik dan HPLC preparatif. Selanjutnya dilakukan identifikasi jamur dan aktinomisetes melalui pengamatan secara morfologis dan analisa molekuler. Dari 25 isolat jamur dan 25 isolat aktinomisetes, sebanyak 56 % jamur (14 isolat) dan 44 % aktinomisetes (11 isolat) mampu menghasilkan antibiotik yang dapat menghambat mikroba uji Staphylococcus aureus , Bacillus subtilis , Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , Candida albican , dan Aspergillus niger . Pemisahan ekstrak antibiotik melalui KLT 1 dan 2 dilakukan pada ekstrak etil asetat dari isolat jamur FT 00045 dan ekstrak butanol dari aktinomisetes AT 00244. Fraksi pada Rf = 0,91 dari ekstrak FT 00045, dan fraksi pada Rf = 0,29 dari ekstrak AT 00244 dilanjutkan untuk dilihat profil kromatogramnya menggunakan HPLC analitik. Isolasi senyawa utama menggunakan HPLC preparatif telah berhasil dilakukan pada ekstrak dari jamur FT 00045 yang terlihat pada waktu retensi 25 menit dan memiliki aktivitas penghambatan terhadap S. aureus , ditandai dengan adanya zona bening sebesar 10,63 mm. Identifikasi molekuler yang dilakukan pada jamur FT 00045 memperlihatkan bahwa isolat ini memiliki 99% homologi dengan Aspergillus fumigatus , sedangkan aktinomisetes AT 00244 memiliki 99% homologi dengan Streptomyces demainii .
English Abstract
objective of this research was to isolate, activity assay, and partial purication of antibiotic extract isolated from East Kalimantan soil fungus and actinomycetes, and to identify isolates by morphological and molecular analysis. first step of this research was fermentation of 25 soil fungus and actinomycetes to produce metabolite that predicted as an antibiotics. After fermentation, extraction process was done to isolate antibiotic compound followed by activity assay of crude extract using Staphylococcus aureus , Bacillus subtilis , Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , Candida albican , and Aspergillus niger . Extract showed highest inhibition activity were purified using Thin Layer Chromatography (TLC), analytical HPLC, and preparative HPLC. isolates were identified by morphological and molecular analysis. Results showed, 56% fungus (14 isolates) and 44% actinomycetes (11 isolates) able to produce antibiotic that inhibit growth of Staphylococcus aureus , Bacillus subtilis , Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , Candida albican , and Aspergillus niger . Crude extract of antibiotic produced by fungus FT 00045 and actinomycetes AT 00244. Fraction at Rf = 0,91 from FT 00045 extract, and fraction at Rf = 0,29 from AT 00244 extract were continued by identification chromatogram profile by analytical HPLC. main component from fraction FT 00045 obtained at retention time 25 minute and has inhibition activity to S. aureus showed by clear zone 10,63 mm. Molecular identification showed that fungus FT 00045 has 99% homology with Aspergillus fumigatus . Fur rmore, actinomycetes AT 00244 has 99% homology with Streptomyces demainii.
| Item Type: | Thesis (Magister) |
|---|---|
| Identification Number: | TES/632.952/NUG/i/041100726 |
| Subjects: | 600 Technology (Applied sciences) > 632 Plant injuries, diseases, pests > 632.9 General topics of pest and disease control |
| Divisions: | S2/S3 > Magister Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian |
| Depositing User: | Endro Setyobudi |
| Date Deposited: | 23 Nov 2011 10:03 |
| Last Modified: | 23 Nov 2011 10:03 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/158926 |
Actions (login required)
 |
View Item |