Pratiwi, Rachmawati Sandra (2014) Isolasi Bakteri Kitinolitik dan Purifikasi Satu Tahap Enzim Kitinase Termostabil dari Isolat LU2. Sarjana thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Turunan kitin memiliki aplikasi yang luas dalam berbagai bidang. Dengan banyaknya manfaat turunan kitin tersebut, maka proses pemecahan kitin menjadi penting. Proses pemecahan senyawa kitin secara enzimatis lebih diutamakan karena ramah lingkungan (Apriani, 2008). Mikroba merupakan sumber enzim yang efektif dan mudah dikembangbiakan. Mikroba yang unggul merupakan faktor penting dalam produksi enzim. Oleh karena itu perlu dilakukan teknik skrining yang tepat untuk mendapatkan mikroba unggul sehingga produksi enzim dapat maksimal. Penggunaan enzim termostabil memberikan banyak keuntungan seperti menurunkan biaya operasi dan meminimalkan resiko kontaminan (Rudiger, 1994). Enzim termostabil diperoleh dari mikroba termofilik (Sumardi, 2005). Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan enzim kitinase termostabil dari mikroba hasil isolasi mikroba dan mengetahui karakteristik enzim. Bakteri diisolasi metode pour plate dari sampel tanah kulit udang dan diinkubasi 1 bulan. Skrining bakteri termofilik dilakukan dengan uji suhu, uji zona bening, dan uji pada media cair. Seluruh tahap inkubasi dilakukan pada suhu 50oC agar menghasilkan enzim termostabil. Produksi enzim dilakukan pada suhu 50oC selama 38 jam dan kemudian dipurifikasi satu tahap untuk mengetahui karakteristik enzim yang dihasilkan. Diperoleh 2 isolat yang memiliki aktivitas kitinolitik yaitu LU1 dan LU2. LU2 memiliki indeks kitinolitik 1,42 yang lebih besar daripada LU1. Aktivitas enzim kasar mengalami peningkatan setelah pemurnian afinitas koloidal kitin dari 0,0066 Unit/mg menjadi 0,0741 Unit/mg. Tingkat kemurnian enzim meningkat sebesar 11,19 kali. Berat molekul kitinase isolat LU2 sebesar 62,48 kDa. Enzim tersebut memiliki kondisi optimum suhu 50oC dan pH 7,0. aktivitas tertinggi pada substrat etilen glikol kitin dibanding substrat koloidal kitin, koloidal kitosan, serbuk kitin, dan serbuk kitosan. Kitinase termostabil dari isolat LU2 selanjutnya dapat dimanfaatkan untuk proses hidrolisis kitin enzimatis menghasilkan turunan kitin.
English Abstract
Chitin derivatives are applied in various fields, therefore chitin-degradation process to obtain its derivatives becomes important. Enzymatic process are preferred as environmentally friendly (Apriani, 2008). Superior microbes are an important factor in enzymes production. To obtain superior microbes, proper screening techniques are necessary so that enzymes production can be maximized. Thermostable enzymes isolated from thermophilic microbes provide many advantages such as low operating costs and low contaminants risk (Rüdiger, 1994). This research aims to get a thermostable chitinase from superior microbe and to characterize the enzyme. Bacteria was isolated using pour plate method from shrimp-shells soil and incubated for 1 month. Thermophilic bacteria was screened using incubation at 37°C, 45°C, and 50°C to see formation of clear zone. The isolated bacteria giving highest index of chitinolytic was futhermore tested on liquid medium to see their ability to degrade chitin. To produce enzyme, the selected bacteria was grown on colloidal chitin liquid medium and incubated at 50°C for 38 h. The obtained enzyme was purified using one step purification chitinase with colloidal chitin afinity method. The isolated bacteria obtained were LU1 and LU2 isolate. Chitinolytic index of LU2 was greater than LU1. The level of purity of the enzyme increased 11,19 times. Crude enzyme activity increased after colloidal chitin affinity purification from 0,0066 units/mg to 0,0741 units/mg. Molecular weight of chitinase obtained from LU2 isolate was 62,48 kDa. The chitinase has an optimum conditions of 50oC and pH 7,0. The enzyme showed highest activity in ethylene glycol chitin substrate than in the colloidal chitin, colloidal chitosan, chitin powder and chitosan powder substrate. Thermostable chitinase from LU2 isolate can be used for chitin hydrolysis to do obtain chitin derivatives.
| Item Type: | Thesis (Sarjana) |
|---|---|
| Identification Number: | SKR/FTP/2014/305/051404853 |
| Uncontrolled Keywords: | enzim termostabil, kitin, purifikasi satu tahap, skrining bakteri,-chitin, one step purification, screening bacteria, thermostable enzymes |
| Subjects: | 300 Social sciences > 338 Production > 338.1 Agriculture |
| Divisions: | Fakultas Teknologi Pertanian > Teknologi Hasil Pertanian |
| Depositing User: | Budi Wahyono Wahyono |
| Date Deposited: | 22 Aug 2014 07:06 |
| Last Modified: | 02 Dec 2021 04:26 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/149703 |
Preview |
Text
SKRIPSI_RACHMAWATI_SP.pdf Download (3MB) | Preview |
Actions (login required)
 |
View Item |