Lyrawati, Diana and Islam, Samsul and Yudani, Tri (2007) Kloning dan Ekspresi Gen Penyandi Antigen 78 dari Mycobacterium Tuberculosis Secara Sistim Heterolog. Project Report. Fakultas Kedokteran - Universitas Brawijaya, Malang. (Unpublished)
Abstract
Antigen 78, protein dari Mycobacterium tuberculosis merupakan antigen yang dengan berat molekul 38kDa yang memiliki spesifisitas tinggi (95%). Untuk memproduksinya dalam jumlah yang besar secara konvensional, beberapa kendala yang harus dihadapi: fasilitas laboratorium dengan kriteria BSL3 yang sangat mahal, menurunnya aktivitas setelah purifikasi. Untuk itulah tim kami melakukan studi kemungkinan menghasilkan antigen secara rekombinan. Dalam penelitian ini dilakukan kloning gen pab yang mengkode antigen 38 dari M. tuberculosis dan diekspresikan secara sistem heterolog di Escherhia coli. Segmen DNA antigen 38 diperoleh dengan cara mengamplifikasi DNA genom M. tuberculosis menggunakan polymerase chain reaction (PCR). Bakteri yang dipergunakan merupakan isolat liar, hasil biakan pasien TBC di Batu-Malang. Sebuah pita dengan besar 900bp dipurifikasi dan diligasikan ke vektor pGmT. pGemT kemudian ditransformasikan ke E. coli DH5α untuk mengecek sequensenya. Seleksi koloni-koloni yang berwarna putih dilakukan dimedia selektiv dengan X-gal. Sequensing segmen pab dilakukan dengan 3130x1 Genetic Analyzer (Applied Biosystem). Analisa rangkaian DNA klon memperlihatkan homologi sebesar 95% dengan sequens M. tuberculosis H37Rv yang telah dipublikasikan. Klon ini kemudian digunakan untuk membuat konstruk ekspresi pab dengan system ekspresi pRoExHT dan selanjutnya ditransformasikan ke into E. coli DH5 α. Klon-klon yang dihasilkan dicek dengan PCR dan sequensing.
English Abstract
-
| Item Type: | Monograph (Project Report) |
|---|---|
| Identification Number: | PEN/571.8/LYR/k/2007/020800476 |
| Subjects: | 500 Natural sciences and mathematics > 571 Physiology and related subjects > 571.8 Reproduction, development, growth |
| Divisions: | Fakultas Kedokteran > Pendidikan Dokter |
| Depositing User: | soegeng sugeng |
| Date Deposited: | 12 Sep 2018 04:10 |
| Last Modified: | 16 Jun 2022 07:27 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/11931 |
![[thumbnail of 020800476 ok.pdf]](http://repository.ub.ac.id/style/images/fileicons/text.png) |
Text
020800476 ok.pdf Download (3MB) |
Actions (login required)
 |
View Item |