Identifikasi Bakteri Dan Karakterisasi Enzim Selulase Kasar Dari Isolat Bakteri Selulolitik P12 Asal Mata Air Gunung Merapi

Oliviani, Kiki (2019) Identifikasi Bakteri Dan Karakterisasi Enzim Selulase Kasar Dari Isolat Bakteri Selulolitik P12 Asal Mata Air Gunung Merapi. Sarjana thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Bakteri sekarang lebih banyak dieksplorasi secara luas untuk produksi enzim selulase karena pertumbuhannya cepat, mampu memproduksi multienzim, stabil pada suhu dan pH yang ekstrim. Proses identifikasi isolat bakteri selulolitik dapat dilakukan dengan menggunakan fenotif, biokimia dan genotif untuk mengetahui jenis atau spesies bakteri tersebut. Selain itu, proses isolasi dan purifikasi enzim harus dilakukan untuk menghilangkan zat pengotor salah satunya dengan menggunakan metode pengendapan menggunakan amonium sulfat. Pada penelitian sebelumnya telah dilakukan isolasi dengan isolat bakteri P12 yang memiliki aktivitas selulolitik tertinggi (2,326 ±0,219). Pada penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi isolat P12 secara molekuler menggunakan gen 16S rRNA dan memurnikan serta mengkarakterisasi enzim selulase hasil dialisis yang diproduksi oleh isolat P12 yang berasal dari mata air Gunung Merapi terhadap variasi suhu, pH, dan ion. Penelitian yang dilakukan bersifat deskriptif dengan menggunakan pendekatan kuantitatif. Penelitian ini dilakukan dengan 3 tahapan yaitu identifikasi jenis bakteri menggunakan gen 16S rRNA, pemurnian parsial enzim selulase hasil ekstraksi dari isolat bakteri selulolitik P12, karakterisasi enzim selulase hasil dialisis (pH dan suhu optimum, stabilitas pH dan suhu, serta pengaruh penambahan ion). Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat bakteri P12 berkerabat dekat dengan bakteri Bacillus licheniformis strain 103D-012 berdasarkan hasil uji 16S rRNA dengan nilai kemiripan 99,51%. Aktivitas spesifik ekstrak kasar enzim selulase yakni 0,0303 U/mg, aktivitas enzim setelah pengendapan dengan amonium sulfat fraksi 70% yakni 0,0107 U/mg, dan aktivitas enzim setelah didialisis yakni 0,0103 U/mg. Karakterisasi enzim selulase hasil dialisis optimum pada pH 7 dan suhu 50°C, bersifat stabil pada suhu 30-90°C, stabil pada asam dan basa (pH 3-9) setelah diinkubasi selama 1 jam. Penambahan ion Ca2+ mampu meningkatkan aktivitas enzim.

English Abstract

Bacteria are widely explored for production of cellulase enzymes because of their rapid growth, capable producing multi-enzyme, stable at extreme temperature and pH. The process of identifying cellulolytic bacteria isolates can be carried out using phenotypes, biochemistry and genotypes to determine the type or species of these bacteria. In addition to that process of isolation and purification of enzyme must be done to remove impurities, one of them by using precipitation method with ammonium sulfate. In previous studies, isolation was carried out with bacterial isolate P12 which had the highest cellulolytic activity (2.326 ± 0.219). In this study aims to identify isolate P12 molecularly using 16S rRNA gene, purify and characterize cellulase enzyme after dialysis produced by isolates P12 originating from Mount Merapi springs purified by variations in temperature, pH, ion. The research conducted was descriptive using a quantitative approach. This research was conducted in three stages, identification of bacterial types using 16S rRNA gene, partial purification of cellulase enzyme extracted from cellulolytic bacterial isolate P12, characterization of cellulase enzyme after dialysis (optimum pH and temperature, stability pH and temperature, and effect of ion addition). The result of research showed that P12 bacterial isolate was related to Bacillus licheniformis strain 103D-012 based on 16S rRNA test with 99,51% percen identity. Specific activity of raw extract of cellulase enzyme was 0,0303 U/mg, enzyme activity after ammonium sulfate sedimentation 70% fraction was 0,0107 U/mg, and enzyme activity after dialysis was 0,0103 U/mg. Cellulase enzyme after dialysis was optimum at pH 7 and 50°C, stable at 30-90°C, stable in acids and bases (pH 3-9) after incubation for 1 hour. Addition of Ca2+ ion can increase the enzyme activity

Other obstract

-

Item Type: Thesis (Sarjana)
Identification Number: SKR/FTP/2019/619/052002506
Uncontrolled Keywords: Enzim Selulase, Karakterisasi enzim, 16S rRNA., enzyme cellulase, enzyme characterization, 16S rRNA
Subjects: 500 Natural sciences and mathematics > 572 Biochemistry > 572.7 Enzymes > 572.756 Enzymes catalyzing reactions of specific chemicals (Cellulases)
Divisions: Fakultas Teknologi Pertanian > Teknologi Hasil Pertanian
Depositing User: Nur Cholis
Date Deposited: 10 Sep 2020 06:49
Last Modified: 24 Oct 2021 02:07
URI: http://repository.ub.ac.id/id/eprint/181624
[thumbnail of Kiki Oliviani (2).pdf]
Preview
Text
Kiki Oliviani (2).pdf

Download (1MB) | Preview

Actions (login required)

View Item View Item