Pengaruh Terapi Kombinasi Azacitidine Dan Ekstrak Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus) terhadap Ekspresi XIAP (X-Linked Inhibitor Of Apoptosis) dan PPAR-Gamma (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor-Gamma) pada Acute Myeloid Leukemia (AML) in Vitro

Subagyo, Khonsaa Aadilah Hafizhoh and Prof. Agustina Tri Endharti, S.Si, Ph.D and Drs. Sofy Permana, M.Sc, DSc (2023) Pengaruh Terapi Kombinasi Azacitidine Dan Ekstrak Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus) terhadap Ekspresi XIAP (X-Linked Inhibitor Of Apoptosis) dan PPAR-Gamma (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor-Gamma) pada Acute Myeloid Leukemia (AML) in Vitro. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Acute Myeloid Leukemia (AML) adalah keganasan yang ditandai dengan diferensiasi abnormal dan proliferasi sel punca hematopoietik yang mengakibatkan supresi dan perubahan komponen pada medula spinalis. Terapi yang dikembangkan saat ini adalah dengan agen hipometilasi, salah satunya yaitu azacytidine. Kombinasi obat anti kanker dapat meningkatkan efektivitas terapi dibandingkan dengan monoterapi. Polisakarida jamur diketahui memiliki kandungan beta glukan yang memiliki efek antikanker. Salah satu sumber beta glukan adalah jamur tiram (Pleurotus ostreatus). Beta glukan bekerja pada beberapa reseptor imun termasuk Dectin-1. Pengikatan antara beta glukan dan dektin-1 dapat menginduksi apoptosis sel AML melalui jalur AKT/PI3K. AKT yang teraktivasi meningkatkan ekspresi protein anti-apoptosis, salah satunya adalah XIAP (X-linked inhibitor of apoptosis). XIAP merupakan protein yang menghambat apoptosis melalui mekanisme penghambatan pada apoptosom, sehingga pelepasan caspase-9 terhambat. Hal ini menyebabkan penghambatan apoptosis pada kasus AML. Berbeda dengan XIAP, PPAR-gamma (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma) justru menginduksi apoptosis melalui aktivasi PTEN yang akan menghambat jalur signaling PI3K/AKT, sehingga ketika jalur PI3K dihambat maka dapat terjadi apoptosis. Sehingga, tujuan dari penelitian ini adalah untuk membuktikan pengaruh kombinasi ekstrak azacitidine dan Pleurotus ostreatus terhadap ekspresi XIAP dan PPARgamma pada Acute Myeloid Leukemia (AML). Jamur tiram (Pleurotus ostreatus) diekstraksi dengan etanol 80%. Sel-sel HL-60 dikultur, dan kemudian dibagi menjadi enam kelompok: kelompok 1 adalah kontrol, kelompok 2 diberi perlakuan dengan AZA 10 uM, kelompok 3-5 diberi kombinasi AZA 10 uM serta ekstrak jamur tiram masing-masing 0,5 , 1 , 2 mg/mL, dan kelompok 6 diberi ekstrak jamur tiram 2 mg/mL saja. Setelah 24 jam, sel-sel tersebut kemudian diuji imunofluoresensi.. Ekspresi XIAP menurun dan PPAR-gamma meningkat secara signifikan pada kelompok perlakuan (p<0,05). Penurunan ekspresi XIAP dan peningkatan PPAR-gamma ditemukan secara berurutan paling efektif pada kelompok sel HL-60 dengan pemberian AZA dan ekstrak jamur tiram 2 mg/ml, ekstrak jamur tiram saja 2 mg/ml, kombinasi AZA dan ekstrak jamur tiram 1 mg/ml, 0,5 μg/ml, AZA saja dan yang terakhir yaitu kontrol negatif. Ekstrak jamur tiram berpotensi menjadi agen terapeutik untuk AML. Kombinasi dengan AZA secara signifikan menurunkan ekspresi XIAP dan meningkatkan ekspresi PPAR-gamma.

English Abstract

Acute Myeloid Leukemia (AML) is a malignancy characterized by abnormal differentiation and proliferation of hematopoietic stem cells resulting in suppression and changes in components of the spinal cord. The therapy currently being developed is hypomethylating agents, one of which is azacytidine. The combination of anti-cancer drugs can increase the effectiveness of therapy compared to monotherapy. Mushroom polysaccharides are known to contain beta glucan which has anticancer effects. One source of beta glucan is oyster mushroom (Pleurotus ostreatus). Beta glucan acts on several immune receptors including Dectin-1. The binding between beta glucan and dectin-1 can induce apoptosis of AML cells through the AKT/PI3K pathway. Activated AKT increases the expression of anti-apoptotic proteins, one of which is XIAP (X-linked inhibitor of apoptosis). XIAP is a protein that inhibits apoptosis through an inhibitory mechanism on the apoptosome, so that the release of caspase-9 is inhibited. This causes the inhibition of apoptosis in AML cases. In contrast to XIAP, PPAR-gamma (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma) actually induces apoptosis through PTEN activation which will inhibit the PI3K/AKT signaling pathway, so that when the PI3K pathway is inhibited, apoptosis can occur. Thus, the purpose of this study was to prove the effect of the combination of azacitidine and Pleurotus ostreatus extracts on the expression of XIAP and PPARgamma in Acute Myeloid Leukemia (AML). Oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) is extracted with 80% ethanol. HL-60 cells were cultured, and then divided into six groups: group 1 was the control, group 2 was treated with 10 uM AZA, groups 3-5 were given a combination of 10 uM AZA and oyster mushroom extract each 0.5 , 1 , 2 mg/mL, and group 6 was given only 2 mg/mL oyster mushroom extract. After 24 hours, the cells were tested for immunofluorescence. XIAP expression decreased and PPAR-gamma increased significantly in the treatment group (p<0.05). Reducing XIAP expression and increasing PPAR-gamma were found to be most effective sequentially in the HL-60 cell group by administering AZA and oyster mushroom extract 2 mg/ml, oyster mushroom extract alone 2 mg/ml, combination of AZA and oyster mushroom extract 1 mg/ml , 0.5 μg/ml, AZA only and finally the negative control. Oyster mushroom extract has the potential to be a therapeutic agent for AML. Combination with AZA significantly decreased XIAP expression and increased PPAR-gamma expression.

Item Type:	Thesis (Magister)
Identification Number:	0423060066
Subjects:	600 Technology (Applied sciences) > 616 Diseases > 616.02 Special topics of disease > 616.025 Medical emergencies / Emergency medicine / Emergency nursing / Triage (Medicine)
Divisions:	S2/S3 > Magister Ilmu Biomedis, Fakultas Kedokteran
Depositing User:	Endang Susworini
Date Deposited:	05 Dec 2023 06:22
Last Modified:	05 Dec 2023 06:22
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/204767

Text (DALAM MASA EMBARGO) khonsaa aadilah.pdf Restricted to Registered users only until 31 December 2025. Download (3MB)

Actions (login required)

View Item