Hubungan antara sCD80 dan sCTLA-4 dengan Penanda Immune Risk Profile Rasio Sel Limfosit T CD4/CD8 pada Penuaan Imun Pasien Lupus

Sumarta, Norma Hanifah and Prof. Dr. dr. Kusworini H.,, M.Kes, Sp.PK (K) and Dr. dr. Hani Susianti,, Sp.PK (K) (2023) Hubungan antara sCD80 dan sCTLA-4 dengan Penanda Immune Risk Profile Rasio Sel Limfosit T CD4/CD8 pada Penuaan Imun Pasien Lupus. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Penuaan merupakan gangguan fungsi tubuh progresif akibat dari berbagai disfungsi jaringan yang dikaitkan dengan peningkatan morbiditas. Keterlibatan sistem imun yang berkaitan dengan usia mengarah pada penurunan progresif dalam kemampuan untuk memicu respon antibodi dan seluler yang efektif terhadap infeksi dan vaksinasi. Fenomena ini yang disebut immunosenescence atau penuaan imun yang mempengaruhi imunitas alami maupun yang didapat. Penelitian sebelumnya menyatakan bahwa penuaan imun tidak hanya dijumpai pada orang usia lanjut, tetapi ditemukan juga pada kondisi autoimun seperti LES. Telah dilaporkan bahwa pasien LES menunjukkan karakteristik imunologis yang menyerupai dengan individu yang tua. Normalnya, sistem imun mengalami perubahan dinamis seiring berjalannya usia. Akan tetapi, pada penyakit autoimun terjadi aktivasi imun kronis yang mempercepat proses penuaan imun dini. Studi terdahulu telah menetapkan sekelompok parameter imun untuk menentukan adanya penuaan imun, dapat diketahui melalui IRP antara lain penurunan rasio CD4/CD8 (<1) , penurunan ekspresi CD80, dan peningkatan CTLA-4. Penurunan rasio CD4/CD8 (<1) terjadi akibat adanya akumulasi sel T CD8+CD28- dan juga dikaitkan dengan adanya perubahan pada respon imun dan perkembangan penyakit LES. Penelitian sebelumnya menyatakan bahwa penurunan rasio CD4/CD8 menandakan adanya penuaan imun akibat dari inflamasi kronis dan seiring bertambahnya usia maka rasio CD4/CD8 cenderung menurun (<1). Penelitian sebelumnya juga menyatakan bahwa CD80 berkurang signifikan seiring bertambahnya usia. Ligan CD80 dapat berikatan dengan CD28 dan CTLA-4. CD80 akan berikatan dengan CTLA-4 yang diekspresikan oleh APC setelah adanya aktivasi sel T. Ikatan tersebut akan memblokir jalur aktivasi sel T. Ekspresi CTLA-4 mencegah pengikatan CD28 ke CD80, dengan demikian menghambat pembentukan sinyal kostimulatori dan menghalangi jalur aktivasi sel T. Penelitian sebelumnya juga menyatakan bahwa peningkatan CTLA-4 pada penuaan imun dapat terjadi karena adanya kelelahan sel limfosit T setelah adanya stimulasi TCR yang berlebihan dan terus menerus dan adanya peningkatan sitokin inflamasi. CTLA-4 memiliki bentuk terlarut sCTLA-4 yang berpotensi dapat mengikat CD80. Penelitian sebelumnya menyatakan bahwa terdapat peningkatan sCTLA-4 pada pasien dengan penyakit autoimun. Pada umumnya, penanda terjadinya penuaan imun hanya dapat dideteksi dari IRP. Akan tetapi, untuk mengamati IRP hanya dapat dilakukan menggunakan flowsitometri dengan mengukur persentase marker kostimulator pada permukaan sel imun yang cenderung sulit, membutuhkan waktu yang lama, alat yang canggih, dan keahlian khusus. Oleh karenanya penelitian ini disusun untuk menemukan penanda baru penuaan imun dengan menggunakan bentuk terlarut molekul kostimulator seperti molekul sCD80 dan sCTLA-4 yang bersirkulasi secara bebas pada sirkulasi. Bentuk terlarut dari penanda tersebut masih belum banyak diteliti. Keunggulan penggunaan penanda terlarut daripada maker reseptor adalah kemampuannya untuk dapat dideteksi di dalam serum dengan metode yang lebih mudah. Tujuan dalam penelitian ini yaitu untuk mengetahui apakah terdapat hubungan antara penanda IRP rasio sel limfosit T CD4/CD8 dengan penanda sCD80 dan sCTLA-4 pada penuaan imun pasien lupus. Populasi penelitian ini adalah pasien LES, lansia usia, dan individu sehat usia produktif. Jumah sampel penelitian yaitu 87 responden, individu muda sebanyak 20 responden, pasie LES sebanyak 35 responden, dan lansia sebanyak 32 responden. Penanda sCTLA-4 dan sCD80 diketahui melalui pengukuran menggunakan uji ELISA. Rasio limfosit T CD4/CD8 didapatkan dengan PBMC dan diukur dengan metode flowsitometri. Uji statistik menggunakan uji normalitas Shapiro Wilk dan Uji Homogenitas Levene. Uji ANOVA digunakan untuk menganalisis perbandingan antar kelompok, apabila datayang didapat tidak terdistribusi normal maka digunakan uji Kruskal wallis. Uji korelasi viii menggunakan korelasi Spearman. Uji statistik menggunakan IBM SPSS Statistics version 23. Berdasarkan analisis deskriptif diketahui bahwa rata-rata kadar sCD80 paling tinggi terdapat pada kelompok lansia, rata-rata kadar sCD80 paling rendah ada pada kelompok individu muda. Pada kelompok individu muda memiliki rata-rata kadar sCD80 sebesar -2707.50 + 12901.23. Kelompok LES memiliki rata-rata kadar sCD80 2962.14 + 18941.79. Berikutnya kelompok lansia memiliki rata-rata kadar sCD80 sebesar 5731.88 + 21464.56. Rata-rata kadar sCTLA-4 tertinggi pada kelompok individu muda, sedangkan rata-rata kadar sCTLA-4 terendah pada kelompok LES. Kadar sCTLA-4 33.75 + 31.97 pada kelompok individu muda. Selanjutnya rata-rata kadar sCTLA-4 22.17 + 20.53 pada kelompok pasien LES. Berikutnya kelompok lansia memiliki rata-rata kadar sCTLA-4 sebesar 29.19 + 20.66. Rata-rata rasio CD4/CD8 tertinggi pada kelompok pasien LES, sedangkan rata-rata rasio CD4/CD8 terendah pada kelompok lansia. Pada kelompok individu muda memiliki rata-rata rasio CD4/CD8 sebesar 0.96 + 0.28, pada kelompok LES rata-rata rasio CD4/CD8 1.03 + 0.54, dan pada kelompok lansia memiliki rata-rata rasio CD4/CD8 sebesar 0.82 + 0.39. Hasil pengujian korelasi hubungan antara kadar sCD80 dengan rasio CD4/CD8 memiliki koefisien korelasi -0.068 dengan probabilitas 0.533 dapat disimpulkan bahwa terdapat hubungan yang tidak signifikan antara kadar sCD80 dengan rasio CD4/CD8. Koefisien korelasi sebesar -0.068 menunjukkan hubungan negatif dan sangat lemah, semakin tinggi kadar sCD80 maka rasio CD4/CD8 akan semakin menurun dan semakin rendah kadar sCD80 maka rasio CD4/CD8 akan semakin meningkat. Berdasarkan hasil pengujian korelasi hubungan antara kadar sCTLA-4 dengan rasio CD4/CD8 memiliki koefisien korelasi -0.063 probabilitas 0.560, terdapat hubungan yang tidak signifikan antara kadar sCTLA-4 dengan rasio CD4/CD8. Koefisien korelasi -0.063 menunjukkan ada hubungan yang negatif dan sangat lemah, semakin tinggi kadar sCTLA- 4 maka rasio CD4/CD8 akan semakin menurun dan semakin rendah kadar sCTLA-4 maka rasio CD4/CD8 akan semakin meningkat.

English Abstract

Aging is a progressive disorder of body function as a result of various tissue dysfunctions which is associated with increased morbidity. Age-related involvement of the immune system leads to a progressive decline in the ability to trigger effective antibody and cellular responses to infection and vaccination. This phenomenon is called immunosenescence or immune aging which affects both natural and acquired immunity. Previous studies suggest that immune aging is not only found in the elderly, but also in autoimmune conditions such as SLE. It has been reported that SLE patients show immunological characteristics similar to those of elderly individuals. Normally, the immune system experiences dynamic changes with age. However, in autoimmune diseases there is chronic immune activation which accelerates the process of premature immune aging. Previous studies have established a group of immune parameters to determine the presence of immune aging, which can be identified through IRP, including decreased CD4/CD8 ratio (<1), decreased CD80 expression, and increased CTLA-4. The decrease in the CD4/CD8 ratio (<1) occurs due to the accumulation of CD8+CD28- T cells and is also associated with changes in the immune response and the development of SLE. Previous research stated that a decrease in the CD4/CD8 ratio indicates immune aging as a result of chronic inflammation and with age the CD4/CD8 ratio tends to decrease (<1). Previous studies have also stated that CD80 decreases significantly with age. CD80 ligand can bind to CD28 and CTLA-4. CD80 will bind to CTLA-4 expressed by APC after T cell activation. This binding will block the T cell activation pathway. Expression of CTLA-4 prevents the binding of CD28 to CD80, thereby inhibiting costimulatory signal formation and blocking the T cell activation pathway. Research previously also stated that an increase in CTLA-4 in immune aging could occur due to exhaustion of T lymphocyte cells after excessive and continuous TCR stimulation and an increase in inflammatory cytokines. CTLA-4 has a soluble form of sCTLA-4 which can potentially bind to CD80. Previous research stated that there is an increase in sCTLA-4 in patients with autoimmune diseases. In general, markers of immune aging can only be detected from IRP. However, observing IRP can only be done using flow cytometry by measuring the percentage of costimulatory markers on the surface of immune cells which tends to be difficult, requires a long time, sophisticated tools, and special expertise. This study was therefore set up to discover new markers of immune aging by using soluble forms of costimulatory molecules such as sCD80 and sCTLA-4 molecules which circulate freely in the circulation. The soluble form of these markers has not been widely studied. The advantage of using a soluble marker rather than a receptor maker is its ability to be detected in serum by an easier method. The aim of this study was to determine whether there is a relationship between the IRP marker CD4/CD8 T lymphocyte ratio and the markers sCD80 and sCTLA-4 in immune aging in lupus patients. The population of this study were SLE patients, the elderly, and healthy individuals of reproductive age. The number of research samples were 87 respondents, 20 young individuals, 35 SLE patients, and 32 elderly respondents. The sCTLA-4 and sCD80 markers were identified through measurements using the ELISA test. The CD4/CD8 T lymphocyte ratio was obtained by PBMC and measured by the flow cytometry method. The statistical test used the Shapiro Wilk normality test and the Levene Homogeneity Test. The ANOVA test is used to analyze comparisons between groups, if the data obtained is not normally distributed, the Kruskal wallis test is used. Correlation test using Spearman correlation. Statistical test using IBM SPSS Statistics version 23. Based on the descriptive analysis, it was found that the average sCD80 level was highest in the elderly group, while the lowest average sCD80 level was in the group of young individuals. In the group of young individuals, the average sCD80 level is -2707.50 + 12901.23. The LES group had an average sCD80 level of 2962.14 + 18941.79. Next, the x elderly group had an average sCD80 level of 5731.88 + 21464.56. The highest average sCTLA-4 level was in the group of young individuals, while the lowest average sCTLA-4 level was in the SLE group. SCTLA-4 levels 33.75 + 31.97 in the group of young individuals. Furthermore, the average sCTLA-4 level was 22.17 + 20.53 in the SLE patient group. Next, the elderly group had an average sCTLA-4 level of 29.19 + 20.66. The highest average CD4/CD8 ratio was in the SLE patient group, while the lowest average CD4/CD8 ratio was in the elderly group. The group of young individuals had an average CD4/CD8 ratio of 0.96 + 0.28, the LES group had an average CD4/CD8 ratio of 1.03 + 0.54, and the elderly group had an average CD4/CD8 ratio of 0.82 + 0.39. The results of the correlation test for the relationship between sCD80 levels and the CD4/CD8 ratio have a correlation coefficient of -0.068 with a probability of 0.533. It can be concluded that there is an insignificant relationship between sCD80 levels and the CD4/CD8 ratio. The correlation coefficient of - 0.068 indicates a negative and very weak relationship, the higher the sCD80 level, the CD4/CD8 ratio will decrease and the lower the sCD80 level, the CD4/CD8 ratio will increase. Based on the results of testing the correlation between sCTLA-4 levels and the CD4/CD8 ratio, it has a correlation coefficient of -0.063, probability 0.560. There is an insignificant relationship between sCTLA-4 levels and the CD4/CD8 ratio. The correlation coefficient -0.063 indicates that there is a negative and very weak relationship, the higher the sCTLA-4 level, the CD4/CD8 ratio will decrease and the lower the sCTLA-4 level, the CD4/CD8 ratio will increase.

Other obstract

-

Item Type:	Thesis (Magister)
Identification Number:	0422060172
Subjects:	600 Technology (Applied sciences) > 616 Diseases > 616.02 Special topics of disease > 616.025 Medical emergencies / Emergency medicine / Emergency nursing / Triage (Medicine)
Divisions:	S2/S3 > Magister Ilmu Biomedis, Fakultas Kedokteran
Depositing User:	Endang Susworini
Date Deposited:	09 May 2023 01:27
Last Modified:	09 May 2023 01:27
URI:	http://repository.ub.ac.id/id/eprint/198988

Text (DALAM MASA EMBARGO) Norma Hanifah Sumarta.pdf Restricted to Registered users only until 31 December 2024. Download (9MB)

Actions (login required)

View Item