Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella Asiatica) Pre Sampai Dengan Post Hatching Terhadap Catalase, Malondialdehyde, Dan Panjang Badan Larva Zebrafish Stunting

Darwitri, - (2018) Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella Asiatica) Pre Sampai Dengan Post Hatching Terhadap Catalase, Malondialdehyde, Dan Panjang Badan Larva Zebrafish Stunting. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Stunting merupakan gangguan pertumbuhan dimana panjang badan sesuai umur <-2 SD berdasarkan grafik pertumbuhan anak WHO. Indonesia berada pada peringkat ke lima di dunia untuk jumlah anak stunting dengan prevalensi sebesar 37,2% pada tahun 2013. Paparan pestisida menjadi salah satu faktor lingkungan yang dapat menyebabkan terjadinya stunting. Rotenon merupakan pestisida alami yang bekerja menghambat kompleks I mitokondria sehingga terjadi peningkatan produksi ROS dan penurunan jumlah ATP. Pada pertumbuhan tulang, ROS dapat menghambat diferensiasi osteoblas dan merangsang osteoklastogenesis sehingga terjadi ketidakseimbangan pada proses formasi dan resorbsi tulang. ROS dapat menyerang polyunsaturated fatty acid menyebabkan terjadinya peroksidasi lipid dengan salah satu biomarkernya adalah Malondialdehyde (MDA). Untuk menghentikan reaksi oksidasi dibutuhkan senyawa antioksidan. Catalase merupakan enzim antioksidan yang yang mengatalisis dismutasi hidrogen peroksida (H2O2) menjadi air dan oksigen. Pegagan memiliki fitonutrien utama yaitu triterpenoid yang berperan sebagai antioksidan sehingga stress oksidatif dapat dicegah. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan pengaruh ekstrak etanol pegagan (Centella asiatica) pada masa pre sampai dengan post hatching terhadap peningkatan kadar Catalase, penurunan kadar Malondialdehyde (MDA), dan peningkatan panjang badan, larva zebrafish (Danio rerio) yang diinduksi rotenon. Metode penelitian ini adalah eksperimen murni dengan desain post test only control group. Penelitian ini menggunakan larva zebrafish usia 2 hpf-6 dpf (n=30/kelompok) yang terdiri dari 5 kelompok yaitu kontrol, rotenon 12.5 ppb pada 2 hpf- 3 dpf, dan kelompok perlakuan (P1, P2, dan P3) yang diberikan rotenon 12.5 ppb 2 hpf- 3 dpf dan pegagan 5 μg/mL dengan lama paparan mulai 2 hpf sampai 4, 5 dan 6 dpf secara berurutan. Panjang badan diukur pada 3-6 dpf menggunakan software Immage Raster versi 3 dari Optilab versi 2.0. Malondialdehyde (MDA) dan catalase diukur menggunakan ELISA pada 6 dpf (n=5). Analsis statistik dilakukan dengan ANOVA menggunakan SPSS versi 23.0 dan dilanjutkan uji LSD dengan tingkat kepercayaan 5%. Hasil penelitian menunjukkan, pada usia 3 dpf (analog bayi baru lahir) tidak terdapat perbedaan yang signifikan panjang badan antara semua kelompok (p-value = 0,247). Pada usia 6 dpf (analog anak 2 tahun), terdapat perbedaan yang signifikan antar semua kelompok (p-value =0.000). Pada kelompok rotenon tejadi hambatan pertumbuhan panjang badan >2SD dibandingkan kontrol. Rotenon menghambat kompleks I mitokondria yang mengakibatkan peningkatan produksi ROS dan penurunan jumlah ATP. ROS dapat menghambat diferensiasi osteoblas dan merangsang osteoklastogenesis dengan meningkatkan ekspresi RANKL. ROS dapat menyerang PUFA menyebabkan terjadinya peroksidasi lipid dengan salah satu biomarkernya adalah MDA. Hal ini ditandai dengan pada kelompok rotenon terjadi penurunan kadar catalase dan peningkatan MDA pada usia 6 dpf. Hasil penelitian menunjukkan terdapat perbedaan signifikan panjang badan 6 dpf antara kelompok rotenon dengan semua kelompok perlakuan (p-value = 0,000). Pemberian pegagan pada kelompok P1, P2, dan P3 mampu mengkoreksi panjang badan sebesar 99,6%. Centella asiatica mengandung triterpen berperan sebagai antioksidan. Centella asiatica juga mengandung makronurien seperti karbohidrat, protein, dan serat serta mikronutrien seperti kalsiun dan zinc yang diperlukan dalam menunjang pertumbuhan linier. Pemberian pegagan selama 4, 5, dan 6 hari signifikan meningkatkan kadar catalase dan menurunkan kadar MDA dibandingkan kelompok rotenon (p-value = 0,000). Centella asiatica berpotensi sebagai scavenger radikal bebas superoksida, hidrogen peroksida, nitrit oksida dan hidroksil. Aktivitas scavenger ini akan menurunkan produksi vii ROS di dalam tubuh, yang akan berdampak pada penurunan kadar MDA. Centella asiatica dapat meningkatkan ekspresi gen Nrf2 sebagai faktor transkripsi yang dapat meningkatkan regulasi ekspresi gen yang mengkode protein antioksidan. Kesimpulan penelitian ini adalah ekstrak etanol pegagan 5 μg/mL dapat meningkatkan kadar catalase, menurunkan kadar Malodialdehyde, dan meningkatkan panjang badan pada larva zebrafish yang diinduksi rotenon.

English Abstract

Stunting is a growth retardation in which the body length corresponds to <-2 SD age based on the WHO child growth chart. Indonesia has fifth ranked in the world for the number of children with stunting prevalence of 37.2% in 2013. Exposure to pesticides is one of environmental factor that can cause the occurrence of stunting. Rotenone is a natural pesticide that works to inhibit mitochondria complex I resulting in increased ROS production and decrease the amount of ATP. In bone growth, ROS can inhibit osteoblast differentiation and stimulate osteoclastogenesis resulting in an imbalance in the formation process and bone resorption. ROS can attack polyunsaturated fatty acid to triger lipid peroxidation with one of its biomarkers is Malondialdehyde (MDA). To stop the oxidation reaction is needed antioxidant compounds. Catalase is an antioxidant enzyme that catalyzes the dismutation of hydrogen peroxide (H2O2) into water and oxygen. Gotu kola has a main phytonutrients of triterpenoids that act as antioxidant so that oxidative stress can be prevented. The aim of this research is to prove the effect of ethanol extract of Centella asiatica pre to post hatching on increasing Catalase level and decreasing Malondialdehyde (MDA) level, and increasing body length in Rotenone-induced zebrafish (Danio rerio) larvae. This research method was true experiment with post test only control group design. This research used zebrafish larvae until 6 dpf that consists of 5 groups; controls, rotenone 12.5 ppb at 2 hpf-3 dpf, and group treatment (P1, P2, and P3) that given rotenone 12.5 ppb 2 hpf-3 dpf and 5 μg/mL Centella asiatica extract at 2 hpf to 4, 5 and 6 dpf respectively. The body length measured on 3-6 dpf using software Image Raster v 3.0 from optilab v 2.0. Malondialdehyde (MDA) and catalase were measured by ELISA on 6 dpf (n = 5). Statistical analysis was performed by ANOVA from SPSS v 23.0 and continued LSD pos hoc test with 5% confidence level. The results showed, at the age of 3 dpf (analog to newborn) there was no significant difference in body length among all groups (p-value = 0.247). At the age of 6 dpf (analog 2 years old in child), there is a significant difference between all groups (pvalue = 0.000). In the rotenone group there was a constraint of growth of body length >2SD compared to control. Rotenon inhibits complex I mitochondria which results in increased ROS production and a decrease in the amount of ATP. ROS can inhibit osteoblast differentiation and stimulate osteoclastogenesis by increasing RANKL expression. ROS can attack PUFA to triger lipid peroxidation with one of its biomarkers is MDA. It is characterized by the rotenone group there is decreased levels of catalase and increased MDA at age 6 dpf. The results showed that there was a significant difference of 6 dpf body length between rotenon group and all treatment groups (p-value = 0,000). Administration of Centella asiatica extract in P1, P2, and P3 were able to correct the body length of 99.6%. Centella asiatica contains triterpenes as antioxidants. Centella asiatica also contains macronurients such as carbohydrates, proteins, and fibers as well as micronutrients such as calcium and zinc necessary to support linear growth. Provision of pegagan for 4, 5, and 6 days significantly increased catalase levels and lowered MDA levels compared to the rotenone group (p-value = 0.000). Centella asiatica has potential as a scavenger of superoxide free radicals, hydrogen peroxide, nitric oxide and hydroxyl. This scavenger activity will reduce the production of ROS in the body, which will have an impact on the decrease in MDA levels. Centella asiatica can increase the expression of the Nrf2 gene which is a transcription factor that can increase the regulation of gene expression that encodes antioxidant proteins. ix The conclusion of this research the 5 μg/mL ethanol extract of Centella asiatica can increase catalase level, decrease Malodialdehyde level, and increase body length in rotenone-induced zebrafish larvae.

Other obstract

-

Item Type: Thesis (Magister)
Identification Number: TES/615.323 849/DAR/p/2018/041808100
Uncontrolled Keywords: DRUGS DERIVED FROM APICEAE
Subjects: 600 Technology (Applied sciences) > 615 Pharmacology and therapeutics > 615.3 Organics drugs > 615.32 Drugs derived from plants and mikroorganisms > 615.323 87 Drugs derived from olive oil
Divisions: S2/S3 > Magister Kebidanan, Fakultas Kedokteran
Depositing User: Endang Susworini
Date Deposited: 24 May 2022 04:08
Last Modified: 24 May 2022 04:08
URI: http://repository.ub.ac.id/id/eprint/190732
[thumbnail of DARWITRI (2).pdf] Text
DARWITRI (2).pdf

Download (8MB)

Actions (login required)

View Item View Item