Identifikasi Level Metilasi Dna Akibat Merokok Pada Penderita Infark Miokard Akut Di Rsud Saiful Anwar Malang

Rusdianto (2016) Identifikasi Level Metilasi Dna Akibat Merokok Pada Penderita Infark Miokard Akut Di Rsud Saiful Anwar Malang. Magister thesis, Universitas Brawijaya.

Abstract

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui level metilasi gen F2RL3 pada penderita Infark Miokard Akut (IMA) yang disebabkan karena aktivitas merokok. IMA merupakan salah satu jenis penyakit kardiovaskuler yang ditandai dengan nekrosis pada jaringan miokard jantung yang disebabkan oleh tidak tercukupinya kebutuhan oksigen yang masuk ke dalam jaringan yang terjadi dalam jangka waktu yang panjang. Pada umumnya IMA diawali dengan kondisi disfungsi endotel yang mengarah kepada terjadinya aterosklerosis atau trombosis. Disfungsi endotel akan direspon oleh sistem imun dengan mensekresikan molekul-molekul proinflamasi sehingga menyebabkan gangguan homeostasis sel endotel, peningkatan molekul adesi, penurunan faktor vasodilasi dan peningkatan faktor vasokonstriksi. Kondisi ini mengarah kepada aktivasi platelet dalam pembentukan plak trombus. Gen F2RL3 [coagulation factor II (trhombin) receptor-like 3] merupakan gen pengkode Protease-Activated Receptor-4 (PAR-4) yang diduga berkontribusi pada salah satu pathway dalam kejadian IMA. PAR-4 merupakan protein permukaan sel yang terlibat dalam respon beberapa protease dalam sistem koagulasi dan berkontribusi dalam regulasi homeostasis seluler serta progresi sejumlah penyakit, termasuk IMA. Over ekspresi pada PAR-4 mengindikasikan tingginya level trombin yang mengarah kepada peningkatan kaskade koagulasi aktivasi platelet. Asap rokok mengandung sejumlah partikulat kimia yang bersifat toksik yang diduga menginisiasi terjadinya trombosis dengan cara menyebabkan inflamasi endotel, memodifikasi profil lipid, meningkakan ROS serta menurunkan respon vaskuler. Asap rokok juga diduga dapat menyebabkan hipometilasi gen F2RL3 sehingga menyebabkan over ekpresi PAR-4. Sebanyak 16 pasien IMA dikoleksi dari CVCU RSUD Saiful Anwar Malang. Isolasi DNA dilakukan dengan cara mengambil darah pasien kemudian dikerjakan sesuai dengan protokol dari Geneaid gSYNC™ DNA Extraction Kit. Whole genome hasil isolasi DNA kemudian dilakukan bisulfite conversion dengan EZ DNA Methylation Gold Kit dan hasilnya diamplifikasi (PCR) dengan primer khusus untuk mendapatkan sekuense CpG island pada cg03636183 dari gen F2RL3. Hasil PCR kemudian dilakukan bisulfite treated-DNA untuk sequencing untuk mengetahui metilasi pada CpG site gen F2RL3. Hasil penelitian ini menunjukan bahwa sampel pasien yang digunakan dalam penelitian ini memiliki: rerata usia 54,07±6,33 tahun, BMI 23,25±3,36 kg/m2, kadar kolesterol total 199,69±49,04 mg/dl, HDL 37,38±12,13 mg/dl, LDL 132,06±51,46 mg/dl, trigliserida 116,5±62,64 mg/dl, mengalami hipertensi 31,25%, mengalami dislipidemia 68,75%, memiliki riwayat keluarga penderita IMA 12,5% dan perokok 50%. Data tentang metilasi gen F2RL3 menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan level metilasi gen F2RL3 pada CpG island cg03636183 yang disebabkan oleh aktivitas merokok. Tiga CpG site yang teramati dalam penelitian ini yaitu CpG site 2, CpG site 3 dan CpG site 4 menunjukkan bahwa pada kelompok IMA perokok dan IMA tidak perokok sama-sama mengalami total metilasi sebesar 25% dari total sampel pasien yang digunakan. Metilasi DNA merupakan viii salah satu mekanisme epigenetik yang dipengaruhi oleh multifaktorial seperti lingkungan (kualitas udara, asap) dan diet makanan. Hasil penelitian ini tidak menujukkan bahwa asap rokok mempengaruhi level metilasi DNA pada pasien IMA di RSUD Saiful Anwar. Pada penelitian ini tidak diketahui tentang durasi dan dosis rokok yang dikonsumsi sehingga menjadi saran untuk peneltian berikutnya. Terdapat faktor lain yang diduga lebih dominan dalam mempengaruhi pola metilasi DNA dibanding asap rokok seperti diet makanan yang dalam penelitian ini tidak dikontrol. Diperlukan data lebih detail tentang variabel merokok (durasi, jumlah yang dikonsumsi), diet makanan serta jumlah subyek studi yang lebih banyak untuk memahami pola metilasi DNA yang berkaitan dengan penyakit IMA.

Item Type: Thesis (Magister)
Identification Number: TES/616. 123 7/RUS/i/2016/041601973
Subjects: 600 Technology (Applied sciences) > 616 Diseases
Depositing User: Nur Cholis
Date Deposited: 05 Apr 2016 09:55
Last Modified: 05 Apr 2016 09:55
URI: http://repository.ub.ac.id/id/eprint/158211
Full text not available from this repository.

Actions (login required)

View Item View Item