Zakiah, Ummu (2015) Pengaruh Pemberian Antibodi Monoklonal Bovine Zona Pelusida 3 Terhadap Jumlah Sel Granulosa Dan Ekspresi Reseptor Follicle Stimulating Hormone (Fsh) Pada Ovarium Mencit (Mus Musculus). Magister thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Imunokontrasepsi merupakan suatu pengembangan metode kontrasepsi dengan menggunakan mekanisme imunologis dalam menghambat fertilisasi dan perkembangannya. Salah satu target pengembangan imunokontrasepsi adalah peran zona pelusida 3 (ZP3) sebagai reseptor primer spermatozoa. Sejumlah penelitian telah membuktikan kemampuan ZP3 dalam membentuk antibodi yang mampu menekan lebih dari 60% proses binding antara spermatozoa dan sel telur manusia serta kemampuan menekan angka kebuntingan pada mencit. Zona pelusida (ZP) erupakan molekul glikoprotein berasal dari sel-sel granulosa dan bersifat imunogenik. Zona Pelusida berperan dalam pengikatan antara spermatozoa dengan sel telur sehingga memicu reaksi akrosom dalam proses fertilisasi. Terdapat gap junction pada zona pelusida yang berperan sebagai media komunikasi timbal balik antara oosit dan sel granulosa. Sel granulose diperlukan sebagai sumber nutrisi dan molekul penting bagi pertumbuhan dan perkembangan oosit. Sedangkan oosit melalui mekanisme parakrin berperan dengan mensekresi growth differentiation 9 (GDF9) yang berfungsi meningkatkan diferensiasi, ploriferasi dan menekan apoptosis sel granulosa. Sel granulose sebagai tempat diekspresikannya reseptor FSH juga mengandung protein Bone Morphogenetic Protein 6 ( BMP6) yang disekresikan oosit. Bone Morphogenetic Protein 6 ini berperan meningkatkan ekspresi reseptor FSH di sel granulosa. Masih terdapat kontroversi terkait efek pemberian imunokontrasepsi terhadap perkembangan folikel dan ovarium. Pemberian imunokontrasepsi akan menambahkan molekul IgG pada permukaan ZP sehingga menyebabkan kerusakan formasi zona pelusida. Antibodi monoklonal bovine zona pelusida 3 (Mab- b ZP3) merupakan sediaan imunokontrasepsi yang didapatkan dengan proses isolasi ZP sapi yang diimunisasikan ke mencit sehingga menghasilkan sel limfosit B. Selanjutnya sel ini menjalani serangkaian proses yaitu difusikan ke sel meyloma sehingga menghasilkan antibodi yang lebih spesifik. Antibodi terhadap b ZP3 ini kemudian dibiakkan kembali agar dapat dihasilkan antibodi monoklonal. Mab- b ZP3 yang memiliki spesifisitas yang tinggi sehingga hanya mengenali satu epitop yang sesuai dan spesifik. Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh pemberian . Mab- b ZP3 terhadap jumlah sel granulosa dan ekspresi reseptor FSH di sel granulose ovarium mencit pada berbagai waktu pengamatan. Penelitian ini merupakan true experiment dengan pendekatan post test only control group design. Penelitian ini menggunakan hewan coba mencit betina ( Mus musculus ) galur balb/C. Sampel dalam penelitian ini berjumlah 36 yang terbagi dalam 3 kelompok control dan 3 kelompok perlakuan. Pengamatan dilakukan pada hari ke-5, ke-10 dan ke- 20 setelah pemberian Phosphate Buffer Saline (PBS) 50 μl pada kelompok control dan Mab-bZP3 pada kelompok perlakuan . Analisis hasil penelitian menggunakan Nested ANOVA dengan tingkat kepercayaan 0,05. Hasil pengujian menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan bermakna rerata jumlah sel granulosa antara kelompok control dengan kelompok perlakuan (folikel preantral p=0,154, folikel antral p=0,123). Pada pengujian perbandingan rerata jumlah sel granulosa antar waktu pengamatan didapatkan p-value lebih dari 0,05 ( folikel preantral p=0,794 dan folikel antral p=0,051 ). Tidak terdapat perbedaan bermakna rerata ekpresi reseptor FSH antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan (folikel preantral p=0,106, folikel antral p=0,079). Tidak terdapat perbedaan bermakna rerata ekspresi reseptor FSH antar waktu pengamatan(folikel preantral p=0,523, folikel antral p=0,641). Penelitian ini membuktikan bahwa pemberian Mab-bZP3 tidak berpengaruh menurunkan jumlah sel granulosa dan ekspresi reseptor FSH di sel granulosa ovarium mencit. Folikel berkembang dengan baik yang ditandai dengan sel granulosa dan ekpresi resptor FSH yang tidak berbeda secara bermakna antar waktu pengamatan. Mab- b ZP3 berpeluang cukup baik sebagai sediaan imunokontrasepsi bagi wanita karena tidak mengganggu proses folikulogensis.
English Abstract
Immunocontraception is a development of contraception method by using immunological mechanism in inhibiting fertilization and its development. One of immunocontraception development target is role of Zona pellucida 3 (ZP3) as primary receptor of spermatozoa. Several research have proven ability of ZP3 in forming antibody that able to decrease more than 60% of binding process between spermatozoa and ovum of human being and ability to decrease pregnancy of mice. Zona pellucida (ZP) is glycoprotein molecule come from granulosa cells and immunogenic. Zona pellucida has role in binding between spermatozoa with ovum so triggers acrosome reaction in fertilization process. re was gap junction at zona pellucida 3 served as reciprocal communication media between oocyte and granulosa cell. Granulosa cell is needed as nutritional sources and important molecule for growth and development of oocyte. While oocyte through paracrine mechanism has role by secreting growth differentiation 9 (GDF9) that serves to increase differentiation, proliferation, and press apoptosis of granulosa cell. Granulosa cell as place to express FSH receptor also contains Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6) that is secreted by oocyte. Bone morphogenetic protein 6 has role to increase FSH receptor expression at granulose cell. re is still controversy relates with effect of immunocontraception giving to development of follicle and ovary. giving of immunocontraception will add IgG molecule at ZP surface so caused damage of zona pellucida formation. Bovine monoclonal antibody of zona pellucida 3 (Mab-bZP3) is immunocontraception preparation that obtained by isolation process of bovine ZP that immunized into mice so produce lymphocyte B cell. n cell will experience series process, that is fused into myeloma cell so produce more specific antibody. Antibody toward bZP3 will be proliferated to produce monoclonal antibody. Mab-bZP3 has high specifity so only know one epitop that is suitable and specific. purpose of this study was to determine effect of bZP3 monoclonal antibody against number of granulosa cells and FSH receptor expression at granulosa cell of mice ovary at various time of observation. research was true experiment with approach of post test only control group design. research used experimental animals of female mice (mus musculus) of balb/c strain. Samples in research were 36 mice divided into 3 control groups and 3 treatment groups. Observation was done at 5th day, 10th day, and 20th day after giving of 50 l phosphate buffer saline (PBS) at control group and 50 l MabbZP3 at treatment group. Analysis of results by using Nested ANOVA with significance level of 0.05. test results showed no significant differences number of granulosa cells mean between control group and treatment group (pre antral follicle p =0.154, antral follicle =0.123). At comparative test of number of granulosa cells mean between observation time obtained p value more than 0.05 (pre antral follicle p =0.794 and antral follicle =0.051). re was no significant differences between FSH receptor expression mean between control group and treatment group (pre antral follicle p =0.106, antral follicle = 0.079). re was no significant differences between FSH receptor expression mean between observation time (pre antral follicle p =0.523, antral follicle p=0.641). research proved that giving of Mab-bZP3 did not influence to decrease number of granulosa cells and FSH receptor expression at granulosa cell of mice ovary. follicle developed well that was marked by granulosa cell and FSH receptor expresion that not different significantly between observation time. Mab-bZP3 has good opportunities as immunocontraception preparation for women because does not disturb folliculogenesis.
| Item Type: | Thesis (Magister) |
|---|---|
| Identification Number: | TES/615.766/ZAK/p/2015/041501330 |
| Subjects: | 600 Technology (Applied sciences) > 615 Pharmacology and therapeutics > 615.7 Pharmacokinetics |
| Divisions: | S2/S3 > Magister Kebidanan, Fakultas Kedokteran |
| Depositing User: | Sugiantoro |
| Date Deposited: | 19 May 2015 14:07 |
| Last Modified: | 19 May 2015 14:07 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/158184 |
Actions (login required)
 |
View Item |