Sulastri, Eni (2018) Pengaruh terapi kombinasi 5-Fluorouracil dan ekstrak etanol benalu mangga (Dendrophthoe pentandra L.Miq) terhadap siklus sel dan p21 pada sel HeLa. Sarjana thesis, Universitas Brawijaya.
Abstract
Kanker serviks merupakan kanker terbanyak kedua pada wanita di dunia, yang disebabkan karena infeksi HPV dengan prevalensi terbanyak HPV tipe 16 dan 18. Perkembangan sel kanker sangat dipengaruhi oleh siklus sel dalam tubuh seseorang. Dalam siklus sel terdapat beberapa enzim yang berperan, terutama siklin, Cdk, dan Cdk inhibitor yang salah satunya adalah p21. Pembelahan sel yang tepat juga dikendalikan oleh adanya check point yang menemukan adanya kesalahan dalam proses dan menginduksi siklus sel arrest terutama dengan menghambat Cdks tertentu sampai perbaikan selesai. Apabila terjadi gangguan dalam siklus sel ini, maka akan terjadi proliferasi sel yang berlebihan. 5-Fluorouracil merupakan obat anti kanker, ditetapkan sebagai salah satu obat antikanker yang paling umum digunakan dan telah dimasukkan ke dalam berbagai program terapi, baik sendiri atau dalam kombinasi dengan obat lain. Benalu Mangga (Dendrophthoe pentandra L.Miq) berpotensi sebagai agen anti kanker karena mengandung kuersetin. Kadar kuersetin benalu mangga lebih tinggi daripada benalu teh. Kuersetin dapat berperan sebagai “chemosensitizer” untuk meningkatkan khasiat 5-Fu pada sel kanker. Oleh karena itu, tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian terapi kombinasi 5-Fluorouracil dan ekstrak etanol benalu mangga dalam menghambat proliferasi sel HeLa melalui penurunan fase G2/M siklus sel dan peningkatan persentase p21. Penelitian ini dilakukan secara eksperimental dengan pendekatan post test only control group design yang dikerjakan di Laboratorium Biomedik dan Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang secara in vitro. Penelitian menggunakan kultur sel HeLa yang dibagi menjadi 6 kelompok yaitu 1. Kontrol negatif (tidak diberi perlakuan), 2. Kontrol positif (5-Fu 5 μg/ml), 3. 5-Fu 5 μg/ml + ekstrak benalu mangga 12,5 μg/ml, 4. 5-Fu 5 μg/ml + ekstrak benalu mangga 25 μg/ml, 5. 5-Fu 5 μg/ml + ekstrak benalu mangga 50 μg/ml, 6. Ekstrak benalu mangga 50 μg/ml,dengan empat kali pengulangan. Setelah diinkubasi 24 jam kemudian dilakukan pemeriksaan siklus sel dan persentase p21 dengan metode flow cytometry. Uji normalitas data menunjukkan bahwa data persentase sel di fase G2/M dan persentase p21 sel HeLa terbukti berdistribusi normal (p value > 0,05). Uji perbandingan berganda menunjukkan bahwa ada perbedaan yang bermakna rerata persentase G2/M dan p21 antara kelompok positif yang hanya diberi 5-Fu dengan kelompok perlakuan yang diberikan terapi kombinasi 5-Fu dengan eksrak etanol benalu mangga berbagai dosis, baik dengan dosis 12,5 μg/ml, 25 μg/ml, maupun dosis 50 μg/ml. Hal ini berarti bahwa ekstrak etanol benalu mangga mampu meningkatkan efektifitas 5-Fu dengan menurunkan persentase sel di fase G2/M serta meningkatkan persentase p21 pada sel HeLa. Pemberian terapi 5-Fu dapat menghambat enzim thymidylate synthase yang menyebabkan terhentinya sintesis DNA sehingga terjadi fase S arrest. Kombinasi dengan ekstrak etanol benalu mangga yang diketahui mengandung flavonoid kuersetin dapat meningkatkan efektifitas 5-Fu dengan menurunkan proliferasi sel melalui jalur PI3K/Akt. Dengan demikian kombinasi 5-Fu sinergis dengan ekstrak etanol benalu mangga dalam menurunkan persentase sel pada fase G2/M. 5-Fu dapat menginduksi penghentian siklus sel tanpa melibatkan peran p53, tetapi dengan peningkatan ekspresi p21 dan pRb. Peningkatan p21 akan menghambat siklus sel melalui penghambatan siklin-CDK. Proliferasi sel selain dapat dihambat melalui interaksi siklin-CDK, juga dapat dihambat melalui aktivasi p21 yang berinteraksi dengan PCNA, sehingga PCNA terhambat sehingga dapat terjadinya DNA repair. Dari hasil penelitian membuktikan bahwa efektifitas 5-Fu dalam meningkatkan persentase p21 dapat ditingkatkan melalui terapi kombinasi dengan ekstrak etanol benalu mangga. Berdasarkan hasil penelitian ini, maka dapat disimpulkan bahwa terapi kombinasi 5-Flourouracil dan ekstrak etanol benalu mangga dapat menurunkan siklus sel di fase G2/M serta dapat meningkatkan persentase p21 pada sel HeLa dengan dosis ekstrak benalu mangga yang efektif 50 μg/ml.
English Abstract
Cervical cancer is the second most common cancer for women worldwide, caused by HPV infection with the highest prevalence of HPV types 16 and 18. The development of cancer cells is strongly caused by the cell cycle in human bodies. There are several enzymes playing vital roles in cell cycle, especially cyclins, Cdk, and Cdk inhibitors; one of which is p21. Proper cell cleavage is also controlled by a check point that finds an error in the process, and induces a cell cycle arrest primarily by inhibiting certain Cdks until the fixation is finished. If interference occured in the cell cycle, the cell proliferation will be excessive. 5-Fluorouracil is an anti-cancer drug designated as one of the most commonly used and has been incorporated into various therapeutic programs either single or by combining with other drugs. Mango (Dendrophthoe pentandra L.Miq) mistletoe has a potential to be anti-cancer agents because containing quercetin. The level of quercetin in mango mistletoe is higher than in tea mistletoe. Quercetin acts as a "chemosensitizer" to increase the efficacy of 5-Fu in cancer cells. Therefore, the aim of this study was to investigate the effect of combined 5-Fluorouracil with ethanol extract of mango mistletoe therapy in inhibiting the proliferation of HeLa cells through decreasing G2/M phase of cell cycle and increasing the percentage of p21. This research was conducted experimentally with posttest only control group design in Biomedical Laboratory and Parasitology Laboratory of Faculty of Medicine, Universitas Brawijaya Malang in vitro. This study used heLa cell culture divided into six (6) groups: 1. Negative control (no treatment), 2. Positive control (5-Fu 5 μg/ml), 3. 5-Fu 5 μg/ml + mango mistletoe extract 12, 5 μg/ml, 4. 5-Fu 5 μg/ml + mango mistletoe extract 25 μg/ml, 5. 5-Fu 5 μg/ml + mango mistletoe extract 50 μg/ml, 6. Mango mistletoe extract 50 μg/ml, with four replications. After 24-hour incubation, cell cycle was examined and the percentage of p21 was evaluated by flow cytometry method. The data normality test showed that cell percentage data in G2/M phase and percentage of p21 upon HeLa cells are normally distributed (p value > 0.05). Multiple comparison test showed that there was a significant difference of G2/M percentage and p21 between positive group given only 5-Fu and treatment group given combined 5-Fu as well as ethanol extract from mango mistletoe in various doses, either with doses of 12.5 μg/ml, 25 μg/ml, or 50 μg/ml. This means that the ethanol extract from mango mistletoe could increase the effectiveness of 5-Fu by decreasing the percentage of cells in G2/M phase and increasing the percentage of p21 in HeLa cells. 5-Fu therapy administration can inhibit thymidylate synthase enzyme that terminates the synthesis of DNA so that the S arrest phase occurs. Combination with ethanol extract from mango mistletoe, acknowledged to contain quercetin flavonoids, can improve the effectiveness of 5-Fu by decreasing cell proliferation through the PI3K/Akt pathway. Thus, a combined 5-Fu is synergy with the ethanol extract of mango mistletoe in decreasing the percentage of cells in the G2/M phase. 5-Fu can induce cell cycle termination without the involvement of p53, but increasing the expression of p21 and pRb. The increase of p21 will inhibit the cell cycle through cyclin-CDK inhibition. Cell proliferation can not only be inhibited through the interaction of cyclin-Cdk, but also be inhibited through activation of p21 interacting with PCNA. Therefore, the inhibition of PCNA will induce DNA repair. The results of this study discovered that the effectiveness of 5-Fu in increasing the percentage of p21 could be improved throughout combination therapy using ethanol extract from mango mistletoe Based on the results of this study, it can be concluded that combined 5-Flourouracil and ethanol extract of mango mistletoe therapy could decrease cell cycle in G2/M phase and increase the percentage of p21 in HeLa cells with the most effective dose of mango mistletoe extract by 50 μg/ml.
Other obstract
-
| Item Type: | Thesis (Sarjana) |
|---|---|
| Identification Number: | TES/615.107 24/SUL/p/2018/041808379 |
| Uncontrolled Keywords: | FLUOROURACIL, ESTROGEN—RECEPTORS, ENDOMETRIUM, MEDICINE, EXPERIMENTAL |
| Subjects: | 600 Technology (Applied sciences) > 615 Pharmacology and therapeutics > 615.1 Drugs (materia medica) > 615.107 24 Experimental research |
| Divisions: | S2/S3 > Magister Kebidanan, Fakultas Kedokteran |
| Depositing User: | Budi Wahyono Wahyono |
| Date Deposited: | 18 Dec 2019 07:23 |
| Last Modified: | 08 Mar 2022 00:54 |
| URI: | http://repository.ub.ac.id/id/eprint/177096 |
Preview |
Text
Eni Sulastri.pdf Download (6MB) | Preview |
Actions (login required)
 |
View Item |